几种生物药剂对松材线虫毒力的初步测定

生物农药对松材线虫(Burasphelenchus xylophilus)室内毒力的测定表明,6102和褐僵菌素Aschersonia sp.具有较强的控制线虫能力。     

松材线虫PCR标准化阳性对照构建及检测体系的建立

建立了松材线虫PCR检测标准化阳性对照及特异性强的PCR检测体系.根据松材线虫rDNA-ITS区和BxPe12基因的特异基因序列设计引物,并从中筛选出一对特异引物cqubs01/cquba01,该引物能从松材线虫特异性扩增出196 bp片段,而不能对其他种类线虫进行扩增.基于优化PCR反应体系和反应程序,稳定的检测体系得以建立,检测灵敏度为100 ps/μL.以松材线虫基因组DNA为模板,以上述特异引物进行PCR扩增,将纯化后的PCR产物与PMD18-T载体连接之后转入大肠杆菌中,筛选出阳性克隆进行测序验证,最终获得了松材线虫的无害化阳性对照,建立了松材线虫标准化阳性对照的PCR检测体系.对来自于不同地区的12批次近100个样品进行了实际检测验证,其结果与实际发生情况一致,说明本检测体系稳定可靠.图3表2参8     

一株黑松-美味牛肝菌菌根辅助细菌的筛选及鉴定

为探讨菌根际有益微生物之间的作用关系及其互作对黑松(Pinus thunbergii)生长的影响,对分离自黑松-美味牛肝菌(Boletus edulis,Be)和黑松-黄色须腹菌(Rhizopogen luteous)菌根际土壤的81株细菌进行菌根辅助细菌(Mycorrhiza helper bacteria,MHB)的筛选.通过干皿对抗法筛选获得1株具MHB潜力的菌株HB12,HB12菌株对Be菌丝生长的平均增长率达34.4%.盆栽试验结果表明,单接Be处理的黑松根系菌根侵染率为36.8%,而双接种Be和HB12菌株处理的菌根侵染率为54.5%;双接种Be和HB12处理、单接Be处理和单接HB12处理较未接种处理的黑松苗高提高44%、36%和24.5%,地径提高27.7%、22.9%和26.5%.由此可确定菌株HB12为黑松-美味牛肝菌的菌根辅助细菌.经形态观察、Biolog系统鉴定及16S rRNA分子鉴定,初步确定菌株HB12为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).     

质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5－1A

以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300 mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01 ng/μL,在25 μF电容、9 kV/cm电场强度、200 Ω电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌的基因导入提供技术支持.为进一步通过基因敲除的方法,选择性地失活特定功能基因,进而确定这些基因在松材线虫病病理进程中的作用奠定基础.图2参16     

对甘薯茎线虫具有杀虫活性的苏云金芽胞杆菌筛选及特性鉴定

为筛选对甘薯茎线虫具有高毒力的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,提取12株供试Bt菌株的晶体蛋白,溶解后加入到甘薯茎线虫悬浮液中,统计3 d和7 d后甘薯茎线虫的死亡率.经初筛和复筛后得到一株对甘薯茎线虫具有高毒力的Bt菌株YBT-008,其对甘薯茎线虫的LC50值为203.76μg/mL.研究了YBT-008的生物学特性,结果表明,YBT-008在LB培养基上培养约12 h后进入稳定期,并且伴随芽胞的形成产生卵圆形的伴胞晶体;SDS-PAGE分析表明YBT-008可产生多种待鉴定的晶体蛋白类型,质粒检测显示该菌株有5条质粒条带.YBT-008的获得为利用Bt防治甘薯茎线虫提供了新型菌株和基因资源.     

重金属铅、镉对矮小拟丽突线虫（Acrobeloides nanus）的亚急性毒性作用

为了探讨重金属Pb、Cd对矮小拟丽突线虫(Acrobeloides nanus)的亚急性毒性作用,采用室内培养的方法,研究了不同浓度Pb和Cd对矮小拟丽突线虫生长发育、繁殖的影响,并对线虫世代间的毒性效应进行了比较.结果表明,1)与对照组相比,各暴露组当代(P0)和后代(F1)线虫平均体长均显著降低(p<0.05,p<0.01);随着重金属浓度的增加,当代(P0)和后代(F1)线虫平均体长呈现逐渐降低的趋势.2)随着Pb、Cd暴露浓度的增加,线虫产卵数逐渐降低;Pb对线虫产卵数的72h-EC20、EC10分别为17.41、4.36mg·L-1,Cd对线虫产卵数的72h-EC50、EC20和EC10分别为4.47、0.91和0.53mg·L-1.以上结果表明,重金属Pb、Cd暴露可显著抑制矮小拟丽突线虫的生长发育、繁殖;线虫体长、产卵数具有明显的重金属浓度依赖性。     

空气负离子暴露对秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）的生物学效应

利用模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)研究了电晕法空气负离子(Electrically generated negative air ions,ENIs)暴露的生物学效应.将成年野生型和mev-1突变型线虫及新鲜虫卵持续暴露于空气负离子中(空气负离子剂量1×105～1.5×105ions·cm-3),观察空气负离子暴露对线虫发育周期、寿命、繁殖性能和性腺细胞凋亡的影响.结果表明:空气负离子暴露可显著加速野生型和mev-1突变型线虫发育(p<0.05),缩短寿命(p<0.05),与野生型相比,空气负离子暴露对mev-1突变线虫寿命影响更大(p<0.05);空气负离子暴露可显著降低线虫后代数量(p<0.05),原因可能在于空气负离子暴露显著诱导性腺细胞凋亡的增加(p<0.05).以上结果表明,持续空气负离子暴露对线虫具有损伤作用,mev-1基因突变导致线虫对空气负离子暴露更加敏感.     

发生和未发生连作芦蒿枯萎病土壤的尖孢镰刀菌数量、产毒能力和致病力

尖孢镰刀菌引起的枯萎病是芦蒿连作障碍主要病害.对芦蒿不同种植年限发病和未发病土壤中尖孢镰刀菌数量、产毒素(镰刀菌酸)能力、致病力等开展研究.对采集的11份土壤样品分析结果显示:相较于不发病土壤,发病率≥40%的土壤尖孢镰刀菌数量显著增加;不发病和发病率≤25%的土壤尖孢镰刀菌数量没有显著差异(P>0.05).发病率为85%和40%的土壤尖孢镰刀菌高产毒素(镰刀菌酸产量>500μg L-1)的菌株比例显著(P<0.05)高于发病率为11%和不发病土壤.致病力测定显示发病率为85%和40%土壤中高致病力菌株比例显著(P<0.05)高于发病率为11%的土壤和不发病土壤,不致病菌株比例显著(P<0.05)低于发病率为11%的土壤和不发病土壤.土壤尖孢镰刀菌数量与连作年限没有显著相关性(P>0.05).发病土壤中,发病率、尖孢镰刀菌高产毒素菌株比例和高致病力菌株(病情指数>2)比例与连作年限显著(P<0.05)相关;未发病土壤中,尖孢镰刀菌高产毒素菌株比例和高致病力菌株比例与连作年限没有显著相关性(P>0.05).随着连作芦蒿发病率的增加,土壤中尖孢镰刀菌菌株数量、高产毒素菌株比例、致病菌株比例均显著增加(P<0.05),未发病连作土壤尖孢镰刀菌菌株数量、高产毒素菌株比例、致病菌株比例均没有显著变化.本研究结果可为连作芦蒿枯萎病发病机理的研究及其防治提供理论基础.     

应用高效离子交换色谱分析青枯菌的致病力分

应用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力的青枯菌进行分析,建立了一种快速检测青枯菌致病力分化的新方法青枯菌纯培养物经过高效离子交换色谱分离得到3个致病力不同的特征峰,大小依次为峰3组分>峰2组分>峰1组分.对10株青枯菌进行色谱分析,并结合番茄组培苗感染试验检测其致病力,结果发现,强致病力菌株经过色谱分离只在峰3的保留时间位置出现单一特征峰,在9 d内即可引起100%的番茄组培苗发病;若菌株经过色谱分离形成3个特征峰,则峰3所占的面积比越大,该菌株的致病性相对就越强.25株不同致病力青枯菌的验证试验表明了该方法的可行性,番茄组培苗发病率x与峰3面积比y之间呈现出良好的线性关系,回归方程y=0.9581x+5.4984,相关系数r=0.986.通过对青枯菌色谱行为、致病力、细胞表而黏附的EPS Ⅰ含量三者之间相互关系的进一步研究,发现青枯菌的致病力越强,则细胞表面黏附的EPSⅠ越多,峰3所占的面积比就越大.图3表6参15     

土壤线虫群落对梨园不同害虫防治策略的响应

为探究土壤线虫群落对梨园不同害虫防治策略的响应,通过田间试验研究北京地区不同害虫防治策略下梨园土壤线虫的群落结构。按照不同的害虫防治策略将梨园划分为常规区(频繁化学防治)、试验1区(农药减施防治)和试验2区(以植物源农药为主的农药减施防治),共统计土壤线虫9 960条,隶属于线虫动物门2纲5目23科43属。试验1区0～20 cm土层土壤线虫数量显著大于常规区(P0.05),试验2区0～20 cm土层土壤线虫数量显著大于试验1区(P0.05)。试验1区、试验2区20～40 cm土层植物寄生线虫数量显著高于常规区(P0.05)。从相对丰度来看,试验1区、试验2区20～40 cm土层食细菌线虫相对丰度显著低于常规区(P0.05),而植物寄生线虫相对丰度则显著高于常规区(P0.05)。常规区具有较高的优势度指数(λ),试验1区、试验2区具有较高的多样性指数(H′)和均匀度指数(J)。以上结果表明,频繁的化学农药防治会影响梨园土壤线虫的群落结构,降低土壤线虫群落的多样性,而化学农药减施并适当施用植物源农药则有利于减少对土壤线虫数量及多样性的影响。     

松针资源开发利用-绿色素制备

本研究以松针为原料,经过一系列物理、化学过程制得天然含锌绿色素--叶绿素锌钠,测定了叶绿素锌钠盐的质量指标、吸光度、耐热性、耐光性,并对叶绿素和叶绿素锌钠的稳定性进行了比较研究.     

贵州麻江马尾松天然中龄林施肥研究

采用正交设计法对贵州麻江马尾松天然中龄林进行施肥试验，结果表明，施肥对林木生长具有良好的效果．至第７年，单株材积平均为对照的１３２．３％；所施元素中Ｎ、Ｐ、Ｋ对单株材积均有很大影响，且都达到０．１以上显著水平；而施Ｐ的自第４年至第７年均有良好的反应，其中以Ｐ２的效果最好；施肥的最优化组合为Ｎ２Ｐ２Ｋ２．     

Optimisation of bisphenol A removal from water using chemically modified pine bark and almond shell

The ability of pine bark and almond shells to remove bisphenol A (BPA) from aqueous solutions was evaluated. Samples of these traditional agro-forestry by-products were milled, sieved into different particle size fractions (0.10–0.15 and 1.5–2.0 mm) and submitted to two different types of treatment. Sorption experiments were conducted in a batch system at room temperature and natural pH. Sorption equilibrium was attained after 48 h for all systems under study. Bisphenol A was adsorbed more effectively on the smaller particles of the sorbents. Pine bark and almond shell pretreated with formaldehyde presented higher sorption efficiency (95%), followed by almond shell (87%) and pine bark (82%) washed with hot water. All the sorption isotherms were found to fit a Freundlich equation, with correlation coefficients (R ²) between 0.823 and 0.989. The sorption coefficient (K _F) ranged from 0.06 to 0.74 (mg^1?1/n ·L ^1/n ·g ^?1). These results indicate that utilisation of both materials as an alternative sorbent for the removal of bisphenol A from contaminated waters is promising because they are available in large amounts and have an acceptable cost–efficiency ratio when compared with traditional adsorbents.     

杉木优良无性系苗造林的效益估算

未来的林业是无性系林业,优良无性系苗造林能把种源选择,种子园的遗传改进、杂交育种、个体选择等成果择其最优部分加以基因复制、利用,从而获得较高的增产效益。本文介绍了12个杉木优良无性系造林后各因子的遗传力和遗传增益。估算了12个优良无性系造林的效益。     

大气中多环芳烃(PAHs)在松针和SPMD上的分布

通过松针监测与半渗透膜被动式采样技术 (SPMD ) ,分析了我国珠江三角洲地区大气中多环芳烃的含量特征、来源及其分布 ,同时对这两种被动式采样技术进行了比较 松针及SPMD主要富集气态多环芳烃 (2— 4环 ) ,气态多环芳烃在松针和SPMD样品中的总含量分别为 313 9— 30 4 3 5ng·g-1和 14 5—116 9ng·SPMD-1·d-1 大气中多环芳烃含量的区域差异明显 ,珠江三角洲中部地区 (广州、佛山和东莞 )大气中多环芳烃的含量高 ,沿海地区的珠海、香港偏低 ,分子标志物指数表明 ,珠江三角洲大气中的多环芳烃主要是热成因 (燃烧 )来源 松针和SPMD对气态多环芳烃的监测具有很好的一致性 ,是进行区域大气污染评价的良好生物指示物     

不同基质对马尾松容器苗及其菌根的影响

以10种培养基质，对马尾松进行容器育苗研究．结果表明：以竹叶为基本材料配制基质，比纯黄心主基质培育的马尾松百日苗，干物质重增加对2％；与蛭石基质相比，增加43.9％；与松树皮基质相比，增加25.0％以松针为基本材料配制的基质效果近似于竹叶．两者对苗木生长的影响，与各处理相比较，均达到了极显著水平．培养基质理化性质与苗木生物量相关的矩阵分析表明，容器基质的客重和孔隙度对苗木生长影响最大;基质内有效养分含量，特别是磷含量的多少很重要．竹叶和松针作为基质，表现了良好的理化性质，促进了马尾松苗木早期菌极化，百日苗面根感染率分别比黄心土基质的百日苗提高12.9％和17.0％同时加快了苗木生长．     

土壤酸化对油松生长的影响

褐色森林土酸化后，pH值下降，同时淋溶出大量Al离子和Mn离子。播种在酸化土壤中的油松种子萌发率稍有提高。生长在酸化土壤的油松苗的叶绿素含量，蒸腾强度，光合速率，相对生长率和干重均下降，原因是Al离子和Mn离子对油松的有毒害作用，并且阻止油松对钙离子和镁离子的吸收。表3参12     

鼎湖山马尾松林凋落物分解对凋落物输入变化的响应

为了了解我国南方森林常见的人为干扰（凋落物收取）活动对生态系统养分循环的影响,研究了鼎湖山马尾松林3种主要树种凋落物分解及其养分释放对凋落物输入量变化的响应。这3种树种分别为马尾松（Pinus massoniana）、荷木（Schimasuperba）和锥栗（Castanopsis chinensis）。凋落物输入量变化分别为凋落物去除（L-）、加倍（L＋）和对照（L）3种处理,每种处理25个重复。经过18个月的处理试验,凋落物分解速率及其养分释放随树种、分解阶段和凋落物处理不同而异。荷木、马尾松和锥栗分解物平均残留率分别为0.46±0.01、0.42±0.01、0.40±0.02,其中,荷木与锥栗、马尾松差异性显著。不同处理间的凋落物分解速率差异显著,加倍、对照和去除处理样地凋落物的平均残留率分别为0.51±0.08、0.53±0.09和0.55±0.08。凋落物加倍处理促进了凋落物分解过程中C的释放,而去除凋落物处理则抑制了N、P的释放。以上结果表明,凋落物收取活动不仅直接带走凋落物中的大量养分,而且抑制了凋落物分解及其养分释放。     

松毛虫遗传多样性研究中AFLP反应体系的建立

以油松毛虫为材料,对T4 DNA连接酶不同用量、预扩增中的Mg~(2+)浓度、dNTP浓度、引物浓度以及选择性扩增巾的预扩增产物稀释倍数、Mg2~(2+) 浓度、dNTP浓度、引物浓度和Taq酶浓度进行了比较分析.最终建立了适合松毛虫的AFLP反应体系.用优化的AFLP反应体系,以油松毛虫、赤松毛虫和马尾松毛虫为材料筛选引物,从81对引物组合中筛选出10对多态性高的引物组合.图9参17