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为探讨PM2.5(particulate matter 2.5)对人肺癌细胞A549迁移、侵袭能力的影响并探讨相关机制,采用含有不同浓度PM2.5的无血清及抗生素培养液对A549细胞培养72 h,利用MTT法检测A549细胞的增殖抑制率。根据MTT实验结果,选择适当的PM2.5暴露浓度用于后续实验,以细胞划痕实验检测细胞迁移能力,transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western Blotting法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、转录因子snail和slug、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及胞核内β-链蛋白(β-catenin)的蛋白表达水平。结果显示:细胞划痕实验结果显示10 μg·mL-1 PM2.5组A549细胞划痕创面愈合率为(46.34 ± 5.19)%,与对照组比较显著增高(P<0.05);transwell小室法迁移和侵袭实验结果显示10 μg·mL-1 PM2.5组穿膜细胞数平均为(165.67±6.62)个和(47.83 ± 2.04)个,与对照组比较显著增多(P<0.05);Western Blotting实验结果显示PM2.5(10 μg·mL-1)可显著上调A549细胞cyclin D1、snail、slug、MMP-2、MMP-9和胞核内β-catenin蛋白表达水平。因此,PM2.5可通过提高Wnt/β-catenin通路活性及其下游cyclin D1、Snail、Slug、MMP-2和MMP-9的蛋白表达而增强A549细胞的迁移、侵袭能力。  相似文献
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