石棉表面改性对石棉诱导人胚肺细胞产生羟基自由基的影响

为了研究用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理温石棉对石棉诱导人胚肺(HEL)细胞产生羟基自由基(·OH)的影响,笔者用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,再将其与人胚肺细胞共同孵育,利用电子自旋捕获法测定反应体系中羟基自由基信号。结果显示,石棉可诱导人胚肺细胞产生羟基自由基,并且所产生的自由基信号(峰高)随石棉浓度升高而增强,呈一定的剂量依赖性。经3种化合物预处理的温石棉组人胚肺细胞所产生的自由基信号(峰高)均明显低于未处理温石棉组。上述结果表明,温石棉可诱导人胚肺细胞产生羟基自由基,但用3种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉诱导人胚肺细胞产生羟基自由基。     

三种化合物对石棉催化过氧化氢产生羟基自由基的抑制作用

为了探讨用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理温石棉对温石棉催化过氧化氢(H2O2)产生羟基自由基(.OH)的影响,用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,再将其加入到过氧化氢溶液中,利用ESP-300型波谱仪测定反应体中羟基自由基信号。结果显示,温石棉可催化过氧化氢产生羟基自由基,并且所产生的自由基信号(峰高)随石棉浓度升高而增强,呈一定的剂量依赖性。用三种化合物预处理石棉后,其催化过氧化氢产生的自由基信号均减弱,而且其抑制作用随化合物浓度的升高而增强。上述结果表明,用三种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉催化过氧化氢产生羟基自由基。     

三种化合物浸泡处理对石棉晶格结构和表面电荷的影响

为了研究经柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠浸泡处理温石棉对温石棉晶格结构和表面电荷的影响,用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,通过透射电镜测定其衍射环直径的大小,分析石棉晶格结构的改变,并利用石棉纤维吸附亚甲蓝能力的测定方法,分析温石棉表面电荷。结果显示,用三种化合物处理石棉后,其衍射环直径均增大,而且用三种化合物处理后的石棉对亚甲蓝的吸附能力均明显降低,并且随着化合物剂量的增加其降低愈明显。上述结果表明,用三种化合物处理石棉,均可改变石棉的晶格结构,且可能减少其表面电荷。     

石棉表面改性对石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度改变的抑制作用

为了探讨研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺（HEL）细胞内游离钙离子（[Ca^2＋]i）浓度的影响。用Flou3／AM标记体外培养的HEL细胞内Ca^2＋后，将不同浓度的温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡过的温石棉与HEL细胞作用1h，荧光分光光度计测定细胞内[Ca^2＋]i。结果显示，20、40、80μg／ml温石棉单独作用于HEL细胞1h，可使HEL细胞内[Ca^2＋]i浓度分别升高3．0％、53．1％和116．7％，且具有明显的剂量-效应关系（r=0．976，P=0．024）。经三种化合物预处理的温石棉组HEL细胞内[Ca^2＋]i浓度均明显低于未处理温石棉组。得出结论，温石棉可致人胚肺细胞内游离钙离子浓度升高，但用三种化合物预处理温石棉，均可抑制温石棉所致人胚肺细胞内游离钙离子浓度的升高。     

单细胞凝胶电泳法测定三种化合物对石棉DNA链断裂效应的抑制作用

 为了探讨3种化合物对温石棉致人胚肺（HEL）细胞DNA链断裂的影响，用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1h后，再将其与HEL细胞共同孵育，利用单细胞凝胶电泳技术，测定了HEL细胞的DNA链断裂程度．结果显示，温石棉可致HEL细胞DNA链断裂，并呈明显的剂量反应关系（r＝0.992，P＜0.01），其中80μg/mL石棉所致DNA链断裂为对照组的7倍．与未处理温石棉组相比，经3种化合物预处理的温石棉所致HEL细胞DNA链断裂均明显减少，其中用等量柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠处理过的石棉，其所致DNA链断裂分别降低了38.3％、61.5％、30.1％，这表明，用上述3种化合物预处理温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性．     

几种化合物对温石棉诱导人胚肺细胞蛋白激酶C活性的影响

为了探讨几种化合物对温石棉诱导人胚肺(HEL)细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响,该研究用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,再将其与HEL细胞共同孵育24小时,测定了HEL细胞胞浆和胞膜中PKC的活性。其结果显示:随着石棉剂量的增加,HEL细胞胞浆和胞膜中的PKC活性逐渐升高,均呈明显的剂量依赖性;经3种化合物预处理的石棉,其所诱导的HEL细胞胞浆和胞膜中的PKC活性均明显低于未处理温石棉组。笔者提示:温石棉可能通过改变细胞内PKC的活性进一步促进肿瘤的发生;用3种化合物预处理温石棉,均可抑制温石棉对HEL细胞PKC活性的诱导作用。