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利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白CTC表面展示系统研究在细胞表面展示鸡毒霉形体粘附素蛋白PMGA1.2的可行性及其免疫原性,为研制能常温长期保藏和运输的禽用口服疫苗奠定基础.用部分pmga1.2基因(pmga1.2p)代替S-层蛋白ctc基因中部且位于表面锚定序列slh下游的片段,构建了2个融合基因ctc-pmga1.2p和csa-ctc-pmga1.2p(csa表csaAB操纵元,其与S-层蛋白牢固地锚定到细胞表面密切相关);将含融合基因的重组质粒电转化入苏云金芽胞杆菌无质粒突变株BMB171中,获得了2个重组菌株BCCG(含ctc-pmga1.2p和携带csaAB操纵元的质粒)和CG(含csa-ctc-pmga1.2p).血凝和血凝抑制试验结果显示,2个重组菌株均成功地在细胞表面展示了重组蛋白PMGA1.2P;小鼠免疫学实验证实,2个重组菌株所展示的重组蛋白均具有免疫原性,其中,重组菌株CG的免疫效果优于BCCG.结果表明,苏云金芽胞杆菌S-层蛋白CTC表面展示系统可被用来研制热稳定性禽用口服疫苗.  相似文献   
2.
苏云金芽胞杆菌无晶体突变株对小鼠和雏鸡的安全性   总被引:1,自引:0,他引:1  
以苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB304为受试菌株,对小鼠和雏鸡进行安全性测试,考察BMB304在鸡肠道中的存留情况,以探索利用苏云金芽胞杆菌S-层表面展示系统研制热稳定性禽用口服活菌疫苗的安全性和可行性.小鼠腹腔一次性注射1010 CFUBMB304菌液1.0 mL,观察14 d,未发现有急性毒性反应.小鼠饮用含BMB304 108 CFU/mL、107 CFU/mL和106 CFU/mL的饮用水28 d,各组小鼠精神和饮食正常,剖检未见异常变化,各剂量组小鼠体重变化、脏器系数、血常规指标及血液生化指标与对照组无显著性差异.雏鸡24 h内灌服1010 CFU BMB304芽胞液1.0mL,14 d内未出现急性毒性反应.饲喂雏鸡含BMB304芽胞108 CFU/g、107 CFU/g和106 CFU/g饲料28 d,雏鸡精神和饮食正常,剖检未见异常变化,各剂量组的日增重与对照组差异不显著.饲喂雏鸡含BMB304芽胞106 CFU/g饲料3 d后,经测定,芽胞能在肠道中萌发并至少存留5 d但不超过7 d.研究表明,苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB304对小鼠和雏鸡安全无毒,且能在鸡肠道内暂时定植,能被用于研制在细胞表面展示外源抗原并能常温长期保存的新型禽用口服疫苗.  相似文献   
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