高选择性手性酯酶产生菌的筛选及应用

从土壤中分离得到230株产酯酶菌株，经反复筛选，从中挑选出一株酶活及选择性均较高的菌株YQ231，该菌株所产酯酶能将外消旋的酯水解为手性醇（环戊烯酮），且该酶优先水解（R）-型酯。经生理生化试验鉴定，该细菌为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。研究了该菌株的产酶过程，结果表明：酶活在24h达最高值。同时研究了该菌株的催化特性，在反应12h时其转化率达48.8％，eep为92.3％，ees为70.3％。图3表2参9     

（R）—酮基布洛芬乙酯对映选择性水解酶产生菌的筛选及其特性

以酮洛芬乙酯为唯一碳源，经过两轮富集培养从土壤中分离得到45株优先生成（S）-酮洛芬和25株优先生成（R）-酮洛芬的菌株，其中产物对映体过量值高于85%的分别有13株和9株。在25株优先选择（R）构型的菌株中，G13号菌的活性较高而且选择性最好，对G13号菌的培养和催化特性研究表明：在培养基中添加吐温-80可以显著提高细菌的催化活力；静息细胞的最适反应温度为40℃，最适pH范围为7.0-8.0，在具有档板和磁力搅拌的三角板中，用G13号菌的静息细胞水解酮洛芬乙酯（50mmol/L），68h的转化率为33.7%，产物（R）-酮洛芬的对映体过量值达到93%。