真菌漆酶在树脂D380上的固定及固定化漆酶的性质

为寻求一种廉价高效的漆酶固定化方法，以树脂D380为载体、戊二醛为交联剂，结合吸附法和交联法固定真菌漆酶，并研究固定化漆酶的性质。最优固定化条件：1g载体在20mL0．7％的戊二醛溶液中交联2h后，加入2mL稀释酶液和5mLpH为4的醋酸一醋酸钠缓冲溶液，在25℃下吸附反应6h，最终获得的酶活回收率为65．94％。固定化漆酶的最适温度为20℃，最适pH为4，在4℃下保存14d仍保持约80％的酶活力。自由漆酶和固定化漆酶的Km值分别为1．207mmol／L和1．616mmol／L，说明固定后漆酶对底物的亲和力有所下降。