我国城市污水处理厂引进BOT模式研究

为了解决我国日益严重的水污染问题,通过BOT模式兴建城市污水处理厂是一个很好的途径.但是随着BOT模式的运作,也带来了很多的问题和困难.通过研究这些问题和困难,提出合理有效的解决措施,将有助于城市污水处理厂的成功运作,有助于解决水污染问题.     

水环境中轮状病毒分子生物学检测技术

轮状病毒是重要的水介传播病原体,其感染性强,稳定性高,是水环境中危害严重的病原微生物,快速、准确地检测水环境中的轮状病毒对于控制疾病爆发和保障水质公共卫生安全极为重要.本文系统介绍了水环境中病毒浓集方法、核酸提取方法以及分子生物学检测方法,综述了水中轮状病毒浓集和分子生物学检测方法的研究进展,并探讨了分子生物学方法在检测水环境中轮状病毒存在的问题及发展趋势.     

水中轮状病毒实时定量PCR外标准品的构建

采用细胞培养和T-A克隆技术,在轮状病毒主要结构蛋白VP7基因序列上设计合成引物,经PCR扩增后将特异性产物连接入pGEM-T-easy载体中,经过酶切鉴定和测序分析获得轮状病毒cDNA标准品.利用常规PCR和实时定量PCR方法对所获得的cDNA标准品进行特异性、稳定性和重复性指标的检验.结果表明,利用此标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系(斜率为-3.353,R2=0.995);实时定量PCR熔解曲线分析表明,温度在81℃±0.5℃的PCR产物是轮状病毒VP7序列上的特异性产物,表明此标准品是轮状病毒特异性的;同时,所制备的标准品在实时定量PCR检测中具有较大的线性范围(9×100～9×1011 copies/μL,每个反应最低可以检测到9个拷贝数的轮状病毒cDNA,表明利用该标准品进行实时定量PCR分析时具有较高的检测灵敏性;此外,该标准品具有较高的稳定性和重复性(3次独立实验CV值在0.2%～0.9%之间),可长期稳定保存.构建的标准品可用作检测水环境中轮状病毒的实时荧光定量PCR的外标准品.     

硫化物测试条件的优化

针对硫化物从采样、运输、分析全过程中,特别是预处理阶段损失严重,导致测定结果经常为未测出,加标回收率低的问题,通过调查分析制定对策;对样品的采集固定、预处理吸收利用量、吹气速度等条件进行了优化选择,对硫化物预处理装置进行技术革新。减少了硫化物的吸收损失、逸散损失,提高了硫化物回收率和准确度。并通过多次实验及加标回收率的验证,取得了良好效果。     

PCR技术检测水中轮状病毒的研究进展

聚合酶链式反应,即PCR(polymerase chain reaction)技术,是一种快速扩增DNA或cDNA序列的方法.水环境中的轮状病毒是导致世界范围内婴幼儿腹泻的主要原因,严重危害着水质安全和人类健康.建立和完善水中轮状病毒灵敏、快速的检测方法对预防和控制水体疾病的暴发具有重要的意义.随着分子生物学技术的发展,PCR及其衍生技术因其具有高度灵敏性、特异性和准确性等特点,成为检测水中轮状病毒最常用的方法.本文综述了利用RCR及其衍生技术,包括逆转录聚合酶链式反应、逆转录半巢式和巢式聚合酶链式反应、多重逆转录聚合酶链式反应、免疫聚合酶链式反应、与免疫磁珠分离相结合的聚合酶链式反应、与细胞培养相结合的聚合酶链式反应及实时定量聚合酶链式反应等,检测水环境中轮状病毒的研究进展,并分析了这些PCR技术在检测水环境中轮状病毒时存在的问题及其应用前景.     

我国城市污水处理厂引进BOT模式研究

为了解决我国日益严重的水污染问题,通过BOT模式兴建城市污水处理厂是一个很好的途径.但是随着BOT模式的运作,也带来了很多的问题和困难.通过研究这些问题和困难,提出合理有效的解决措施,将有助于城市污水处理厂的成功运作,有助于解决水污染问题.