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发根农杆菌转化海边香豌豆及转化体的体细胞胚胎发生 总被引:1,自引:0,他引:1
将海边香豌豆无功苗的子叶和下胚轴切段在附加ρ(2,4-D)=1mgL^-1,ρ(6BA)=0.5mgL^-1的MS培养基上预培养3d,然后与发根农杆菌A4菌液共培养30min。洗涤之后,在附加羧苄青霉素的无激素的MS培养基上培养。7-10d后,外植体切面处长出许多毛状根。继代培养时生长旺盛,且产生许多侧根和分枝。志状根的诱导频率与无菌苗培养天数和外植体来源部位有关。子叶切块的诱导率明显高于下胚轴,16d龄无菌苗的子叶切块诱导毛状根的频率最高。乙酰丁香酮处理菌液可以有效提高子叶外植体的毛状根诱导频率。将毛状根切段培养在含有ρ(2,4-D)=1.0mgL^-1的MS培养基上可诱导出愈伤组织。该种愈伤组织转移到含有ρ(2,4-D)=0.3mgL^-1的MS培养基上培养时,诱导出了许多早期体细胞胚。检测的转化组织均含有农杆碱和甘露醇。图2表1参19 相似文献
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沙打旺耐盐细胞系的筛选及特性分析 总被引:6,自引:0,他引:6
以沙打旺(Astragalus adsurgens) 无菌苗下胚轴切段为外植体,诱导愈伤组织.该愈伤组织通过逐步提高NaCl 浓度以及在ρ(NaCl) =12 g/L和无盐条件下往返培养的多步选择法,获得能适应ρ(NaCl) = 12 g/L的耐盐细胞系(SNr) .在胁迫下SNr 能显著积累脯氨酸;同时还具有对PEG的交叉抗性,和CK 相比愈伤组织可溶性蛋白SDS- PAGE图谱,出现四条新多肽( Mr≈31×103、30×103 、28×103 、26×103) ,它们可能与耐盐性有关. 相似文献
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通过高钙离子浓度、高pH值方法结合PEG处理诱导红豆草羟脯氨酸抗性系和苜蓿根癌农杆菌转化系原生质体融合,融合机制表现为两种形式,第一种为相连膜在中间部位形成一个大的小泡,第二种为随相连膜的解体产生很多较少的泡状结构,融合过程中形成的小泡直接来自凝集膜,而不是亚显微小泡相互融包的产物,温度明显影响原生质体融合的频率和速度,甘油和二甲基亚砜可以防止膜破裂,从而促进原生质体融合,培养20d以后,在选择培养基得到含10-20个细胞的细胞团。 相似文献
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用基因枪介导法将水稻几丁质酶基因导入小麦 总被引:3,自引:0,他引:3
利用PDS1000/氦气基因枪将水稻几丁质酶基因导入小麦幼胚盾片愈伤组织.基因枪轰击后在含有50mg/L硫酸卡那霉素的培养基上经过多步骤筛选和分化,从5个小麦品种共800多个幼胚中获得了6株绿苗,对此6株绿苗进行了PCR和Southern杂交分析.结果表明,其中4株绿苗为转基因植株,转化率最高可达1.2%.图3表2参17 相似文献
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