用连续提取法研究芘在鱼鳃表面的结合形态

建立了研究鱼鳃表面芘的结合状态的四步连续提取方法．分别用H2O、CaCl2、CH3OH和n-C6H14+CH2Cl2(1:1, v/v)混合液提取经暴露的鱼鳃．操作定义的前3步分别提取松散附着在鳃表的鱼鳃黏液中的芘,紧密附着在鳃表的鱼鳃黏液中的芘以及直接吸着在鱼鳃表皮上的芘,第4步则用来提取鱼鳃组织吸收的芘．其提取的芘分别占总量的 4．0％、12．1％、45．2％和38．7％．经3 h暴露,进入鳃组织的芘仅为总测定量的三分之一强,因此大部分芘并未进入鳃组织．单独进行的五步CH3OH连续提取实验结果证明,CH3OH提取步骤能有效地解吸鳃表吸着的芘,但不会导致鳃组织中芘的释放．动态实验结果表明,黏液结合态芘在暴露1h左右即达到平衡,而鳃表吸着态和鳃组织吸收态芘在暴露3h内含量迅速上升,3 h后显著趋缓．     

鲤鱼鱼鳃粘液对铜的络合特征

用络合滴定法研究了鲤鱼鱼鳃粘液对铜的络合特性 ,并根据实测数据考察了不同拟合方法的优劣 .结果表明 ,在选定的滴定范围内 ,单配体模型可以很好地描述粘液和铜之间的相互作用 .各种拟合方法中 ,常用的经线性变换的Scatchard方法误差最大 ,其余方法相差不大 .对这些方法进行一次迭代可以大大改善拟合精度和稳健性 .由此得到的条件稳定常数为 7 0 5 ,络合容量为 0 1 5 8μmol·mg- 1C .     

不同性质天然水中铜在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)鳃表的形态及对虹鳟的毒性

测定了在差异很大的4种水样(京密引水渠、北京地下水、长江南京段和汤旺河)中铜对虹鳟(Oncorhynchusmykiss)的半致死浓度,同步分析了各类水样参数和鳃铜蓄积量.用生物配位模型计算了铜在水相的形态分布和在鱼鳃表面的吸附量.研究了铜的水相形态、鳃表吸附量和鱼鳃蓄积量及毒性的关系.结果表明,铜的毒性与水相游离铜含量并无线性关系,但与鳃组织蓄积量成正比.图6参10     

鲤鱼鱼鳃微环境酸碱条件与铜形态分布模拟

用鱼鳃微环境测定装置和化学平衡计算方法,研究了在人工河水中暴露于铜的鲤鱼鳃部微环境的pH、碱度、粘液含量和铜形态分布.结果发现,鱼鳃pH平衡点为6.92,人工河水pH高于或低于此值时,鱼鳃微环境pH偏低或偏高.变化幅度约达-0.6至0.4 个pH单位.根据实测结果分别建立了计算人工河水和鱼鳃微环境碱度以及鱼鳃粘液分泌量随暴露铜含量和pH变化的定量模型.化学平衡计算结果说明,在pH6至9范围内,人工河水中优势态铜从游离态铜过渡到羟基络合态铜.由于粘液和pH差异的影响,鱼鳃微环境中生物有效态铜含量显著低于人工河水.这样的差别在酸性条件下尤为显著.     

短期暴露实验中铜在鱼鳃表面的结合状态

利用逐级提取的方法研究了短期暴露实验过程中鱼鳃表面不同结合状态的铜随时间变化的过程．考虑到实验过程中水环境条件的动态变化，对实验数据进行了校正．结果表明，鱼鳃对铜的吸收在3h左右达到稳态平衡，水提铜、鱼鳃表面易交换铜以及鱼鳃表面难交换铜随时间变化趋势一致。     

nano-TiO_2与1,2,4-TCB联合作用对斑马鱼鳃组织结构及染色体损伤研究

采用组织病理切片法、微核及彗星试验研究nano-TiO_2和1,2,4-TCB联合染毒对斑马鱼鳃组织结构、细胞微核率及DNA损伤的毒性效应。结果表明,单独nano-TiO_2暴露不会导致斑马鱼鳃组织结构损伤,也不会引起明显的微核及染色体损伤。1,2,4-TCB(≥10 mg·L~(-1))会引起鳃组织和细胞染色体的损伤。nano-TiO_2与1,2,4-TCB联合作用会加重斑马鱼的鳃组织结构损伤,出现鳃小片排列严重紊乱,表皮细胞断失严重,鳃小片上皮细胞坏死脱落,鳃丝结构模糊等症状。两者联合作用会引起鳃细胞微核率增加和彗星细胞率的增加,呈现一定的剂量-效应关系,且两者间的联合作用具有协同作用。对彗星试验的尾部DNA百分比、尾长及尾距的分析发现,与对照组和单独作用相比,两者联合作用对彗星指标均有显著增强作用,这表明两者联合作用对染色体的损伤属于非特定片段损伤。     

微塑料颗粒对虹鳟免疫基因表达的影响

微塑料在海洋中分布广泛,鱼类是否会受到影响及受影响的程度暂并不明确.本文通过实验室产生2×105MP·L-1浓度的微塑料水体,研究当虹鳟暴露在含有不同粒径微塑料颗粒(0.2、1、20、40和90μm)的水体中2 h后,微塑料颗粒在鱼鳃的附着及其鳃组织免疫基因表达的变化特征.结果表明,微塑料颗粒会附着在虹鳟的鳃上,且在从内到外不同鳃片上均有分布,附着程度与微塑料颗粒的粒径大小有关.暴露2 h后虹鳟鳃组织上的部分免疫基因的表达发生变化,包括IFN-γ上调及IL-1β、S100A1和SAA的下调.本文通过对免疫基因表达变化的研究表明,水体中的微塑料颗粒会附着在虹鳟的鳃上,且会导致虹鳟出现免疫反应,论文成果可为相关领域的研究提供基础数据.     

鲤鱼鱼鳃微环境酸碱条件下铜形态分布模拟

用鱼锶微环境测定装置和化学平衡计算方法，研究了在人工河水中暴露于铜的鲤鱼部微环境的ＰＨ、碱度、粘液含量和铜形态分布，结果发现，鱼鳃ＰＨ平衡点为６．９２，人工河水ＰＨ高于或低于此值时，鱼鳃微环境ＰＨ偏低或偏高。变化幅度约达－０．６至０．４个ＰＨ单位，根据实测结果分别建立了计算人工河水和鱼鳃微环境碱度以及鱼鳃粘液分泌量随暴露铜含量和ＰＨ变化的定量模型，化学计算结果说明，以ＰＨ６至９范围内，人工河水中优     

金鱼(Carassius auratus)对颗粒态镉的鳃吸收

采用水相平衡态镉浓度不变（0.01mg/L),增加水铝矿颗粒吸附态镉暴露的实验方法，研究了金鱼(Carassius auratus)对颗粒态镉的鳃吸收，结果表明，鳃中镉含量均随态镉暴露浓度增加，且镉／铝含量比明显高于水相，从而证实了颗粒态镉的鲁鳃吸收有效性，金鱼鳃吸收态镉的主要过程是：随水流流经鳃表面的颗粒态匐会着在鳃表粘液上，在鳃部微环境下，吸附的镉发生解吸而被鳃部细胞吸收，颗粒物及未被吸收的镉在鳃丝表面短暂停留后与脱落粘液一起随水流从鳃部排出。     

彩虹方头鱼(Paracheirodon innesi)鱼鳃微环境特性及铜的生物有效性

建立了测定小个体鱼种鳃部微环境特殊条件的高密度暴露方法，利用这种方法测定了彩虹方头鱼（Paracheirodon innesi）鱼鳃微环境的、 pH、碱度、粘液含量等参数， 并根据测定结果计算了鱼鳃微环境中铜的形态分布。结果表明：高密度暴露可在15s左右建立动态平衡，鱼鳃与外部水体平衡pH7.2。鱼鳃微环境中，碱度在碱性条件下迅速增加。计算并讨论了鱼鳃微环境与外部水相中铜的形态分布和有效态含量差异。