流化床生物反应器培养青蒿毛状根生产青蒿素

利用自制的流化床生物反应器进行青蒿毛状根多层培养生产青蒿素．对毛状根在生物反应器生长过程的形态特征进行观察,并在合适的工艺条件下,经２０ｄ分批培养获得生物量干重２１．３ｇ／Ｌ,青蒿素产量３４９．８ｍｇ／Ｌ,并对培养过程中底物消耗的动力学进行了研究．     

青蒿试管苗开花及用花器官为外植体诱导丛生芽生产青蒿素

将培养于MS培养基上5wk的青蒿试管苗置于光周期13，光强6000lx，温度为26℃（昼）和22℃（夜）的条件下，成功地诱导其开花，利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽，发现不同浓度（ρ）的6－BA对丛生芽的诱导率和青蒿素的生物合成有重要影响。结果表明：以花蕾为外植体诱导丛生芽的最佳培养基是：MS附加4.0mg L^-1的6－BA和0.05mg L^-1的NAA；但当ρ（6－BA）在0－0.5mg L^-1之间时，有利于青蒿素的合成ρ（6－BA）=0.5-4mg L^-1时抑制青蒿素的生命合成，丛生芽中促进青蒿素合成的最佳ρ（6－BA）为0.5mg L^-1，用HPLC法测定发现用此法得到的丛生芽青蒿素的含量比直接利用叶片诱导的丛生芽青蒿素含量高1倍。     

Effect of cadmium on photosynthetic pigments, lipid peroxidation, antioxidants, and artemisinin in hydroponically grown Artemisia annua

The effects of different cadmium (Cd) concentrations (0, 20, 60, and 100 μmol/L) on hydroponically grown Artemisia annua L. were investigated. Cd treatments applied for 0, 4, 12, 24, 72, 144, 216, and 336 hr were assessed by measuring the changes in photosynthetic pigments, electrolyte leakage, malondialdehyde (MDA) and antioxidants (ascorbic acid and glutathione), while the artemisinin content was tested after 0, 12, 144, 216, and 336 hr. A significant decrease was observed in photosynthetic pigment levels over time with increasing Cd concentration. Chlorophyll b levels were more affected by Cd than were chlorophyll a or carotenoid levels. The cell membrane was sensitive to Cd stress, as MDA content in all treatment groups showed insignificant differences from the control group, except at 12 hr treatment time. Ascorbic acid (AsA) content changed slightly over time, while glutathione (GSH) content took less time to reach a maximum as Cd concentration increased. Cd was found to promote synthesis and accumulation of artemisinin, especially at concentrations of 20 and 100 μmol/L. In conclusion, Cd stress can damage to photosynthetic pigments, and vigorously growing A. annua showed a strong tolerance for Cd stress. Appropriate amounts of added Cd aided synthesis and accumulation of artemisinin.     

辣根过氧化物酶在体外条件下对青蒿素生物合成的影响

通过细胞提取液，在体外条件下研究了辣根过氧化物酶对青蒿素生物合成的影响．细胞提取液以磷酸与Tris两种缓冲液制备．结果表明，辣根过氧化物酶在以磷酸缓冲液制备的细胞提取液中，很大地促进了青蒿素的生物合成，青蒿素的含量提高约1倍左右，而外加青蒿酸对青蒿素的生物合成并无显著的影响．以Tris缓冲液制备细胞提取液，外加过氧化物酶并不能促进青蒿素的生物合成．图4参12     

雾化生物反应器培养青蒿毛状根生产青蒿素

利用超声雾化生物反应器进行青蒿毛状根多层培养生产青蒿素．对超声雾化生物反应器中营养雾流动状况及毛状根生长过程的形态特征进行观察,并在合适的工艺条件下,经20d分批培养获得生物量10．3g／L,青蒿素产量179．1mg／L．     

青蒿无性系中青蒿素生物合成的相关因素

通过诱导丛生芽的方法得到青蒿高产无性克隆系S1,并用S1进行了青蒿素生物合成相关因素的研究 .发现在Hoagland培养液中添加 0 .4 4mg/L浓度的ZnSO4或者 5 .72mg/L的HBO3 时 ,能有效提高青蒿素的含量 .研究表明 ,青蒿素含量和青蒿各株系间的遗传差异存在很大关系 ,RAPD分析的结果表明 ,用OPA15能够在青蒿高产株系中扩增到OPA15 10 0 0 这一特异性片段 .另外 ,对青蒿素含量和青蒿生殖生长关系的研究表明 ,青蒿素含量最高的发育时期是现蕾期 .图 7表 1参 19     

中药青蒿的生理生化特征及其研究进展

中药青蒿即黄花蒿 (ＡｒｔｅｍｉｓｉａａｎｎｕａＬ .) ,与分类学上的青蒿 (Ａｒｔｅｍｉｓｉａａｐｉａｃｅａ)同属菊科 (ＡｓｔｅｒａｃｅａｅｏｒＣｏｍｐｏｓｉｔａｅ)蒿属(Ａｒｔｅｍｉｓｉａ) ,两者均为一年生草本植物且形态上非常相似 ,最明显的区别是黄花蒿的叶片为三回羽状全裂 ,而青蒿为二回羽状全裂 .青蒿广泛分布于全国各地 ,多生于海拔 40 0ｍ以下的丘陵平地[1] .现在这种植物广泛分布于世界各地[2 ] .青蒿在许多地区被用于编制花环 ,提取香料 ,更重要的是从青蒿中分离出的青蒿素是所有抗疟药中起效最快、疗效最好、毒性最低…     

非生物胁迫诱导青蒿素生物合成基因的表达

对离体培养青蒿试管苗中3个青蒿素合成相关基因的非生物胁迫诱导表达模式进行了初步研究.半定量RT-PCR测定结果表明,当暴露于冷、热和紫外光后,青篙植株的紫穗槐-4,11-二烯合酶基因(ADS)和细胞色素P450单加氧酶基因(CYP71AV1)转录上调;相反,在未经胁迫处理的情况下,ADS和CYP71AV1基因的表达水平较低,而在胁迫处理前后细胞色素P450还原酶基因(CPR)转录所产生的mRNA均保持恒定.同时,冷胁迫的诱导效果也得到实时荧光定量RT-PCR测定数据的支持.经低温锻炼的青蒿试管苗,其ADS和CYP71AV1基因的转录产物拷贝数比对照分别提高11倍和7倍,而CPR基因的mRNA拷贝数与对照基本持平.短暂预冷处理还可显著提高青蒿试管苗的青蒿素含量,达到7.5～8.8 mg/g干重,比对照提高66.7%～95.6%,为进一步探索利用环境胁迫促进青蒿素高产的新途径提供了可能性.图2表3参21