猪精液酸性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的纯化及性质水 |
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作者姓名: | 黄小红 罗忠宝 黄一帆 陈欣颖 黄俊平 |
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作者单位: | 福建农林大学动物科学学院动物保健研究所,福州,350002 |
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基金项目: | 福建省自然科学基金项目,2006年福建省高等学校新世纪支持计划资助 Supported by the Natural Sciences Foundation of Fujian |
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摘 要: | 以杜洛克猪精液为材料,采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-32阴离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得纯化倍数为27.64、比活力为1 773.25 U mg~(-1)的酸性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶纯酶制剂.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定,纯酶两种亚基相对分子质量分别为129.13×10~3和62.24×10~3.对其酶学性质的研究结果表明,酶的等电点为5.10,最适pH值为5.5,最适温度为60℃.酶在pH 3.6~9.2、温度10℃~55 ℃的范围内较稳定.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨罐葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物,测得米氏常数K_m为0.455 mmol L~(-1),最大反应速度V_m为17.34μmol L~(-1)min~(-1),活化能为41.70 kJ mol~(-1).图8表1参15
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关 键 词: | 猪精液 酸性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 纯化 酶学性质 acidic N-acetyl-β-D-glucosaminidase |
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