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采用代谢流量分析方法评估二噁英对细胞的代谢干扰
引用本文:张保琴,张海军,王龙星,王金成,杨常青,陈吉平.采用代谢流量分析方法评估二噁英对细胞的代谢干扰[J].环境化学,2012,31(11).
作者姓名:张保琴  张海军  王龙星  王金成  杨常青  陈吉平
作者单位:1. 中国科学院大连化学物理研究所,大连,116023
2. 满洲里出入境检验检疫局技术中心,满洲里,021400
基金项目:国家重点基础研究发展计划
摘    要:以肝癌细胞HepG2为供试细胞,选用5个不同浓度的二噁英(0、0.001、0.01、0.1和1.0 nmol.L-1),探讨2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞的毒性效应.采用90%甲醇离心法实现蛋白与代谢产物的分离,建立了高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)分析胞外液中的23种代谢产物(20种氨基酸、乳酸、甘油和尿素)的方法.建立的HPLC-MS/MS分析方法对各化合物的加标回收率可达91%—105%之间,化合物浓度的标准偏差均小于10%.在此基础上,结合代谢流量分析系统研究了2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞内代谢流的影响.结果表明,随着浓度的增高,2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞代谢的干扰作用呈增强趋势.2,3,7,8-TCDD降低了细胞对葡萄糖的吸收,并进一步抑制了HepG2细胞糖酵解的速率.此外,2,3,7,8-TCDD导致了HepG2细胞乳酸代谢流的明显增加,由此使细胞产生了过量的乳酸.

关 键 词:HPLC-MS  MS  代谢流量分析  细胞代谢产物  2  3  7  8-TCDD

The influence of dioxin on cell metabolism evaluated by the metabolic network flexibility analysis
Abstract:
Keywords:HPLC-MS/MS  metabolic flux analysis  cell metabolite  2  3  7  8-TCDD  
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