采用代谢流量分析方法评估二噁英对细胞的代谢干扰 |
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引用本文: | 张保琴,张海军,王龙星,王金成,杨常青,陈吉平.采用代谢流量分析方法评估二噁英对细胞的代谢干扰[J].环境化学,2012,31(11). |
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作者姓名: | 张保琴 张海军 王龙星 王金成 杨常青 陈吉平 |
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作者单位: | 1. 中国科学院大连化学物理研究所,大连,116023 2. 满洲里出入境检验检疫局技术中心,满洲里,021400 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划 |
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摘 要: | 以肝癌细胞HepG2为供试细胞,选用5个不同浓度的二噁英(0、0.001、0.01、0.1和1.0 nmol.L-1),探讨2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞的毒性效应.采用90%甲醇离心法实现蛋白与代谢产物的分离,建立了高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)分析胞外液中的23种代谢产物(20种氨基酸、乳酸、甘油和尿素)的方法.建立的HPLC-MS/MS分析方法对各化合物的加标回收率可达91%—105%之间,化合物浓度的标准偏差均小于10%.在此基础上,结合代谢流量分析系统研究了2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞内代谢流的影响.结果表明,随着浓度的增高,2,3,7,8-TCDD对HepG2细胞代谢的干扰作用呈增强趋势.2,3,7,8-TCDD降低了细胞对葡萄糖的吸收,并进一步抑制了HepG2细胞糖酵解的速率.此外,2,3,7,8-TCDD导致了HepG2细胞乳酸代谢流的明显增加,由此使细胞产生了过量的乳酸.
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关 键 词: | HPLC-MS MS 代谢流量分析 细胞代谢产物 2 3 7 8-TCDD |
The influence of dioxin on cell metabolism evaluated by the metabolic network flexibility analysis |
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Abstract: | |
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Keywords: | HPLC-MS/MS metabolic flux analysis cell metabolite 2 3 7 8-TCDD |
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