|
|||||
|
|
| 反向PCR法克隆芳香烃龙胆酸降解途径中诱导型龙胆酸1,2-加双氧酶基因 | |
| 引用本文： | 赵渝,郭鲁申,徐亚同,陆贻通,高林.反向PCR法克隆芳香烃龙胆酸降解途径中诱导型龙胆酸1,2-加双氧酶基因[J].应用与环境生物学报,2007,13(1):87-92. |
| 作者姓名： | 赵渝 郭鲁申 徐亚同 陆贻通 高林 |
| 作者单位： | 1. 华东师范大学资源与环境科学学院,上海,200062;上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234 2. 上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234 3. 华东师范大学资源与环境科学学院,上海,200062 4. 上海交通大学资源与环境系,上海,201101 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划);上海市重点基础研究项目;上海市重点学科建设项目 |
| 摘 要： | 龙胆酸1,2-加双氧酶(GDO)是芳香烃龙胆酸途径的一个关键酶.产碱假单胞菌P25X具有保守性与诱导性各一组GDO同工酶,突变株SNZ28的保守型龙胆酸1,2加双氧酶基因(GDOⅠ)被链霉素/奇霉素抗性基因打断,但在含有龙胆酸盐的基本培养基上,仍能明显观察到GDO的活性.由龙胆酸诱导生长的SNZ28全蛋白二维电泳结果分析,获得了一个与Ralstoniasp.U2的GDO酶有极高同源性的蛋白点.根据对该蛋白点的N端和Q-Tof测序的结果,设计了一对简并引物,克隆了诱导型GDO酶的片段,通过对此片段的分析,设计了逆向PCR引物,利用Southern blot杂交,确定了合适的限制性内切酶(SalⅠ和SphⅠ),以单一酶切的P25X基因组DNA自联后的产物为模板,进行反向PCR.测序表明,获得了一段1047bp与Ralstoniasp.U2.的龙胆酸1,2-加双氧酶具有极高同源性的序列.研究结果揭示了SNZ28中存在诱导型GDO酶.本文中也对不同来源的GDO酶进行了比较研究,其结果为进一步对生物降解基因的进化研究打下了基础.图4表2参16 |
| 关 键 词： | 芳香烃 龙胆酸 诱导酶 反向PCR法 |
| 收稿时间： | 2006-02-27 |
| 修稿时间： | 2006-05-10 |
Cloning and Sequencing of Inducible Enzyme in Aromatic Gentisate Degradative Pathway Using Inverse PCR Method |
|
| ZHAO Yu,GUO Lusheng,XU Yatong,LU Yitong,GAO Lin.Cloning and Sequencing of Inducible Enzyme in Aromatic Gentisate Degradative Pathway Using Inverse PCR Method[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2007,13(1):87-92. | |
| Authors: | ZHAO Yu GUO Lusheng XU Yatong LU Yitong GAO Lin |
| Institution: | 1. College of Environmental Science and Resources, East China Normal University, Shanghai 200062, China;2 .College of Life and Environment Science, Shanghai Normal University, Shanghai 200234, China;3. Department of Environment and Resources, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 201101, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | aromatic hydrocarbon gentisic acid inducible enzyme inverse PCR method |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ | |