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苯胺对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性评价
引用本文:蒋伟,朱洪坤,清江.苯胺对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性评价[J].生态毒理学报,2018,13(5):256-261.
作者姓名:蒋伟  朱洪坤  清江
作者单位:上海出入境检验检疫局工业品与原材料检测技术中心,上海 200135
基金项目:质检总局科技计划项目(2017IK216)
摘    要:探讨不同浓度的苯胺化合物对小鼠成纤维细胞L929的体外毒性作用,为满足危险化学品分类鉴定和风险评估需求、更好地预防环境化合物对人体健康的损害提供理论依据。体外培养L929细胞,分别将不同浓度的苯胺化合物(0、0.001、0.01、0.1、1、10μg·mL~(-1))加入培养基中处理细胞,在不同时间点分别取材,MTT检测细胞增殖率,AO/PI染色检测细胞存活率,Annexin V-PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,相关检测试剂盒测定细胞内活性氧(ROS)的含量及总谷胱甘肽的含量。结果表明,高浓度(1、10μg·mL~(-1))的苯胺化合物对L929细胞的生长和增殖具有显著的抑制效应。即使浓度降低至0.1μg·mL~(-1),在处理48 h后,细胞的存活数量显著下降,说明其对细胞增殖具有浓度和时间的累积效应和依赖性。同时,对各组细胞采用流式细胞仪测定细胞凋亡,发现低浓度的苯胺对细胞凋亡影响并不明显,但高浓度的苯胺处理后,细胞凋亡和坏死数量显著增加。ROS含量和GSH含量检测结果显示,较低浓度的苯胺对细胞氧化应激反应并无显著影响,但浓度至0.1μg·mL~(-1)时,细胞较对照组出现明显的氧化应激反应,说明细胞已受损,再继续培养将会导致细胞死亡。上述研究结果提示,高浓度苯胺化合物可显著影响L929细胞存活率,且具有时间和浓度累积效应。其毒性机制可能与细胞内活性氧增加、谷胱甘肽耗竭有关。

关 键 词:苯胺  L929细胞  细胞毒性  细胞凋亡
收稿时间:2017/11/27 0:00:00
修稿时间:2018/4/22 0:00:00

Cytotoxicity Evaluation of Phenylamines to L929 Cell Lines in Vitro
Jiang Wei,Zhu Hongkun,Qing Jiang.Cytotoxicity Evaluation of Phenylamines to L929 Cell Lines in Vitro[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2018,13(5):256-261.
Authors:Jiang Wei  Zhu Hongkun  Qing Jiang
Institution:Technical Center for Industrial Products and Raw Materials Inspection and Testing, Shanghai Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shanghai 200135, China
Abstract:
Keywords:phenylamines  L929 cell line  cytotoxicity  apoptosis
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