| 定点突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善 |
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| 引用本文： | 蔡少丽,邹有土,黄建忠,林琳.定点突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善[J].应用与环境生物学报,2013(1):43-47. |
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| 作者姓名： | 蔡少丽 邹有土 黄建忠 林琳 |
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| 作者单位： | 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心;福建师范大学生命科学学院;福建省现代发酵技术工程研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30270 033);福建省自然科学基金项目(B0120001,C0410009);福建工业微生物研发平台建设项目(2006H0085)资助~~ |
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| 摘 要： | 利用重叠延伸PCR方法对扩展青霉脂肪酶基因进行体外定点突变,构建了K115R与随机突变体ep8双突变的重组质粒pAO815-ep8-K115R.将该质粒电转化到毕赤酵母GS115中进行异源表达,获得双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS.与野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变体脂肪酶PEL-ep8-GS进行比较,发现双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS在40℃温浴30 min后残余酶活为89%,比野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变体脂肪酶PEL-ep8-GS分别提高54%和27%;双突变体脂肪酶PEL-ep8-K115R-GS的Tm值为42.2℃,比野生型脂肪酶PEL-GS提高3.5℃,比随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS提高2.0℃.研究结果表明对扩展青霉脂肪酶的分子改造能提高其热稳定性.
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| 关 键 词： | 扩展青霉 脂肪酶 定点突变 毕赤酵母 热稳定性 |
Improvement of Thermostability of Penicillium expansum Lipase by Site-directed Mutagenesis |
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| CAI Shaoli,ZOU Youtu,HUANG Jianzhong,& LIN Lin.Improvement of Thermostability of Penicillium expansum Lipase by Site-directed Mutagenesis[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2013(1):43-47. |
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| Authors: | CAI Shaoli ZOU Youtu HUANG Jianzhong & LIN Lin |
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| Institution: | 1,2,3(1Engineering Research Center of Industrial Microbiology,Ministry of Education,Fujian Normal University,Fuzhou 350108,China)(2College of Life Sciences,Fujian Normal University,Fuzhou 350108,China)(3Engineering Research Center of Fujian Modern Ferment Technology,Fujian Normal University,Fuzhou 350108,China) |
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