克雷伯氏菌产1,3-丙二醇菌株选育及甘油脱水酶基因转录分析 |
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引用本文: | 聂玲燕,方慧英,诸葛斌,宗红,张成,诸葛健.克雷伯氏菌产1,3-丙二醇菌株选育及甘油脱水酶基因转录分析[J].应用与环境生物学报,2013(1):25-29. |
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作者姓名: | 聂玲燕 方慧英 诸葛斌 宗红 张成 诸葛健 |
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作者单位: | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院工业微生物研究中心;江南大学食品科学与技术国家重点实验室 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(“863”计划,20 09A A02Z210)资助~~ |
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摘 要: | 通过对野生克雷伯氏菌(Klebsiella)进行紫外诱变,获得一株耐高浓度甘油及高浓度1,3-丙二醇的突变菌株A-39-3,该突变株产1,3-丙二醇的量较野生菌株提高了58%,副产物2,3-丁二醇和乙醇的量分别降低了27%和19%.为探讨突变株高产1,3-丙二醇的原因,通过对突变菌株发酵过程中关键酶的酶活跟踪分析,发现1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)的酶活力与野生菌株相差不大,甘油脱氢酶(GDH)的酶活力略有下降,而突变菌株的甘油脱水酶(GDHt)的酶活力明显高于野生菌株.并采用半定量RT-PCR方法,从转录水平上比较甘油脱水酶基因的差异,结果发现突变菌株A-39-3甘油脱水酶基因的相对mRNA转录水平是野生菌株K的2.58倍,分析说明该突变株1,3-丙二醇产量的提高与关键酶基因dhaB的mRNA转录水平关系密切.
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关 键 词: | 克雷伯氏菌 1 3-丙二醇 紫外诱变 甘油脱水酶 半定量RT-PCR |
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