|
|||||
|
|
| 牛肠激酶基因工程菌的构建、高密度发酵、纯化及活性鉴定 | |
| 引用本文： | 李德华,苟兴华,胡海洋,徐琦,刘忠荣,吴洽庆,余晓东.牛肠激酶基因工程菌的构建、高密度发酵、纯化及活性鉴定[J].应用与环境生物学报,2006,12(6):819-823. |
| 作者姓名： | 李德华 苟兴华 胡海洋 徐琦 刘忠荣 吴洽庆 余晓东 |
| 作者单位： | 1. 重庆师范大学生命科学院,重庆,400047;成都地奥制药集团有限公司,成都,610041 2. 成都地奥制药集团有限公司,成都,610041 3. 成都地奥制药集团有限公司,成都,610041;四川大学化工学院,成都,610065 4. 成都地奥制药集团有限公司,成都,610041;中国科学院成都生物研究所,成都,610041 5. 重庆师范大学生命科学院,重庆,400047 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 肠激酶（enterokinase，EK）是一种专一识别DDDDK氨基酸序列、并水解K后肽键的丝氨酸蛋白水解酶．根据GenBank序列进行人工合成牛肠激酶轻链基因cDNA，测序正确后将其插入甲醇酵母分泌型载体pPICZαA，得到重组质粒pPICZαA／EKL，重组载体经线性化后转化Pichia pastoris SMD1168H，筛选得到重组牛肠激酶轻链工程菌．分别对重组酵母工程菌进行高密度发酵、rEKL（recombinant enterokinase light chain，rEKL）纯化、N端序列测定、生物学活性鉴定等研究工作．结果表明，发酵上清中rEKL含量高，纯化的rEKL专一性强、无其他杂酶活性、N端15个氨基酸序列与文献报道一致．图5参17 |
| 关 键 词： | 肠激酶(enterokinase EK) 甲醇酵母(Pichia pastoris) 高密度发酵 |
| 收稿时间： | 2006-06-08 |
| 修稿时间： | 2006-06-29 |
Construction, High-Density Fermentation and Purification of Recombinant Enterokinase Catalytic Subunit in Pichia pastoris |
|
| LI Dehua,GOU Xinghua,HU Haiyang,XU Qi,LIU Zhongrong,WU Qiaqing,YU Xiaodong.Construction, High-Density Fermentation and Purification of Recombinant Enterokinase Catalytic Subunit in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2006,12(6):819-823. | |
| Authors: | LI Dehua GOU Xinghua HU Haiyang XU Qi LIU Zhongrong WU Qiaqing YU Xiaodong |
| Abstract: | |
| Keywords: | enterokinase Pichia pastoris high-density fermentations |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |