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| 扩展细胞色素P4502A6对大位阻底物的适应性 | |
| 引用本文： | 唐德芳,张志刚,裴小琼,袁帅,胡承,吴中柳.扩展细胞色素P4502A6对大位阻底物的适应性[J].应用与环境生物学报,2009,15(1). |
| 作者姓名： | 唐德芳 张志刚 裴小琼 袁帅 胡承 吴中柳 |
| 作者单位： | 1. 四川大学生命科学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610041;中国科学院成都生物研究所,成都,610041 2. 中国科学院成都生物研究所,成都,610041 3. 四川大学生命科学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610041 |
| 基金项目： | 中国科学院百人计划项目，四川省青年科技基金 |
| 摘 要： | 细胞色素P450酶(P450)的分子改造及其催化的生物转化是当前的两个研究热点.本研究以扩展P450 2A6的底物适应性为目标,通过尝试对P450 2A6酶进行N-端修饰提高表达量、筛选随机突变库以及点突变改变活性位点重要氨基酸残基等手段,在两个随机突变体中未筛选到功能突变体,但通过点突变重要氨基酸残基获得了新的突变体P450 2A6 (N297Q/I300A).该突变体具有比野生型和已报道的其它突变体更广泛的底物适应性,能够催化氧化大位阻底物6-苄氧基吲哚(6-OBzl-indole)生成蓝绿色物质.该物质经质谱测定为靛蓝类二聚体化合物.实验表明,其中两个氨基酸残基的变化都是关键突变,此结果与最新的P450 2A6突变体晶体结构研究相符.计算机模拟显示,I300A突变导致活性口袋在铁卟啉环的垂直和水平方向都增大,使其能接纳在两个方向都有位阻的底物;而297位的天冬酰胺是一个功能保守的残基,N297Q的变化可能与氢键等弱作用有关.图4表1参29 |
| 关 键 词： | 细胞色素P450 2A6 点突变 生物转化 6-苄氧基吲哚 |
Expanding the Substrate Spectrum of Cytochrome P450 2A6 towards Bulky Substrates |
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| TANG Defang,ZHANG Zhigang,PEI Xiaoqiong,YUAN Shuai,HU Cheng,WU Zhongliu.Expanding the Substrate Spectrum of Cytochrome P450 2A6 towards Bulky Substrates[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2009,15(1). | |
| Authors: | TANG Defang ZHANG Zhigang PEI Xiaoqiong YUAN Shuai HU Cheng WU Zhongliu |
| Abstract: | |
| Keywords: | CYP2A6 |
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