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黄颡鱼黑色素细胞原代培养及迁移相关基因克隆分析
引用本文:程炜轩,许国焕,熊达,张丽,吴清洋,郭莹姿,谭文俊.黄颡鱼黑色素细胞原代培养及迁移相关基因克隆分析[J].生态毒理学报,2014,9(3):1035-1040.
作者姓名:程炜轩  许国焕  熊达  张丽  吴清洋  郭莹姿  谭文俊
作者单位:1. 广东省微生物研究所, 广州 510070
2. 广东省菌种保藏与应用重点实验室, 广州 510070
3. 广东省微生物应用新技术公共实验室, 广州 510070
4. 省部共建华南应用微生物国家重点实验室, 广州 510070
5. 广东碧德生物科技有限公司, 广州 510663;1. 广东省微生物研究所, 广州 510070
5. 广东碧德生物科技有限公司, 广州 510663;1. 广东省微生物研究所, 广州 510070
5. 广东碧德生物科技有限公司, 广州 510663
基金项目:广东省科学院青年科学研究基金
摘    要:黑素皮质素受体-1(MC1R)在鱼体中对黑色素细胞的分化及迁移起主要的调控作用,而且在神经系统和免疫系统中表现出不同功能。本研究对黄颡鱼表皮黑色素细胞的培养条件进行探索,并在此基础上对MC1R基因进行克隆,为后续研究黄颡鱼黑色素异常的细胞及分子机理研究提供基础。结果表明,黄颡鱼表皮黑色素细胞在27 ℃培养条件下,72 h开始贴壁生长,培养基中添加20 %小牛血清培养效果比添加10%小牛血清好。MC1R基因克隆方面,黄颡鱼MC1R基因全长为936 bp,编码312个氨基酸,与剑尾鱼(Xiphophorus maculates)、孔雀鱼(Poecilia reticulata)、条斑星鲽(Verasper moseri)、海鲈(Dicentrarchus labrax)、大菱鲆(Psetta maxima)等5种鱼类MC1R基因的同源性分别为97%、96%、90%、90%、90%,系统分析结果显示,黄颡鱼MC1R基因在进化树上的位置与黄颡鱼的分类所处位置基本吻合。证明黄颡鱼表皮黑色素细胞原代培养的条件为:27℃,添加20% 小牛血清,所克隆基因为黄颡鱼MC1R基因。

关 键 词:黑素皮质素受体  原代培养  克隆  黄颡鱼
收稿时间:2014/1/17 0:00:00
修稿时间:2014/3/14 0:00:00

Primary Culturing of Melanoma Cells and Cloning Analysis of Migration-related Gene in Pelteobagrus fulvidraco
Cheng Weixuan,Xu Guohuan,Xiong D,Zhang Li,Wu Qingyang,Guo Yingzi and Tan Wenjun.Primary Culturing of Melanoma Cells and Cloning Analysis of Migration-related Gene in Pelteobagrus fulvidraco[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2014,9(3):1035-1040.
Authors:Cheng Weixuan  Xu Guohuan  Xiong D  Zhang Li  Wu Qingyang  Guo Yingzi and Tan Wenjun
Abstract:
Keywords:melanocortin receptor  primary culture  cloning  Pelteobagrus fulvidraco
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