| 利用PCR-DGGE技术分析乳制品中的乳酸菌 |
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| 引用本文： | 马俊孝,孔健,季明杰.利用PCR-DGGE技术分析乳制品中的乳酸菌[J].应用与环境生物学报,2009,15(4). |
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| 作者姓名： | 马俊孝 孔健 季明杰 |
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| 作者单位： | 山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 在食品发酵行业,需要一种简捷有效的方法检测发酵产品中的有益微生物.聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(Ploymerase chain reaction and denaturing gredient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术广泛应用于微生物生态学的研究.采用PCR-DGGE对5种含有乳酸菌的乳制品进行了菌群组成分析,并通过传统培养方法和核酸序列分析进行了验证.结果表明,所有测试样品中的活菌数量都在106～109 cfu/mL之间,通过平板培养法分离出了形态明显的杆状菌和链球状菌,对其进行16S rDNA核酸序列测定及同源性分析,将其鉴定为德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus).建立了由已知乳酸菌组成的DGGE参考阶梯(Reference ladder),可用其对相应菌株进行DGGE鉴定.用两对不同引物进行PCR-DGGE分析,除样品1外,试样中均检测到德氏乳杆菌和嗜热链球菌.对DGGE参考阶梯未能直接鉴定的样品1的电泳条带进行同收、序列分析,分别鉴定为卷曲乳杆菌(L.crispatus)和鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus).同时发现,引物R518-F357对嗜热链球菌模板的识别效率高于引物Lac1GC-HDA2.以上结果表明,RCRDGGE技术可以对样品中的乳酸菌进行快速的分析和鉴定.图4表1参30
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| 关 键 词： | 乳酸菌 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳 酸奶 rRNA基因可变区 益生菌 发酵乳制品 |
Detection of the Lactic Acid Bacteria in Commercial Yoghurts by PCR-denaturing Gradient Gel Electrophoresis |
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| MA Junxiao,KONG Jian,JI Mingjie.Detection of the Lactic Acid Bacteria in Commercial Yoghurts by PCR-denaturing Gradient Gel Electrophoresis[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2009,15(4). |
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| Authors: | MA Junxiao KONG Jian JI Mingjie |
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| Abstract: | A2. Those results suggested that DGGE could be considered a reliable approach for rapid detection of bacteria in commercial yoghurt products. Fig 4, Tab 1, Ref30 |
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| Keywords: | 16S lactic acid bacteria PCR-DGGE yoghurt variable region of 16S rRNA gene probiotics fermented dairy product |
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