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海栖热袍菌耐高温β-甘露糖苷酶基因的克隆及表达
引用本文:张敏,关国华,江正强,李颖,李里特.海栖热袍菌耐高温β-甘露糖苷酶基因的克隆及表达[J].应用与环境生物学报,2007,13(3):365-368.
作者姓名:张敏  关国华  江正强  李颖  李里特
作者单位:1. 中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083
2. 中国农业大学生物学院,北京,100094
基金项目:教育部跨世纪优秀人才培养计划;国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:以海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8基因组DNA为模板,克隆得到β-甘露糖苷酶基因(man2).测序分析表明,该基因全序列为2358bp,编码785个氨基酸,分子量约为92×103.根据蛋白质氨基酸的同源性分析,该β-甘露糖苷酶与新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana)Man2(accession No.AAK52304.1)的同源性最大,达到80%.将此基因连接至表达载体pET-28a( )并转化到大肠杆菌BL21细胞中,经IPTG诱导,β-甘露糖苷酶活力达5.96U/mL.粗酶的温度稳定性分析表明,该酶的热稳定性好,90℃处理10min,活力回收率65%,具有重要的工业应用前景.图3表1参17

关 键 词:耐高温β-甘露糖苷酶  海栖热袍菌  重组蛋白  表达
收稿时间:2005-12-27
修稿时间:2005-12-272006-04-04

Cloning and Expression of a β-Mannosidase Gene in Escherichia coli from the Extreme-thermophilic Thermotoga maritima
ZHANG Min,GUAN Guohua,JIANG Zhengqiang,LI Ying,LI Lite.Cloning and Expression of a β-Mannosidase Gene in Escherichia coli from the Extreme-thermophilic Thermotoga maritima[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2007,13(3):365-368.
Authors:ZHANG Min  GUAN Guohua  JIANG Zhengqiang  LI Ying  LI Lite
Abstract:
Keywords:
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