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地衣芽孢杆菌生麦芽糖α-淀粉酶的基因克隆与鉴定
引用本文:訾楠,沈微,石贵阳,王正祥.地衣芽孢杆菌生麦芽糖α-淀粉酶的基因克隆与鉴定[J].应用与环境生物学报,2009,15(1).
作者姓名:訾楠  沈微  石贵阳  王正祥
作者单位:江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:以地衣芽孢杆菌ATCC14580基因组DNA为模板,PCR扩增出1.7 kb大小的麦芽糖淀粉酶基因amyM,克隆入表达载体pET-28a(+),转化Escherichia.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,测定麦芽糖淀粉酶酶活性.结果表明,麦芽糖淀粉酶基因amyM获得了活性表达,酶活力为3.797 U/mL,SDS-1PAGE电泳结果显示出相对分子质量约为67×103的特异性蛋白质条带.酶学性质分析表明,重组麦芽糖淀粉酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH为6.5,在45℃以下的中低温环境保持稳定,且能在比较宽的pH范围内(pH 4.5~8.5)稳定.图3表1参16

关 键 词:地农芽孢杆菌  生麦芽糖α-淀粉酶  基凶克隆  酶学性质
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