| 免疫磁珠分离与实时定量PCR技术联合检测水中轮状病毒的研究 |
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| 引用本文： | 杨万,何苗,李丹,施汉昌,刘丽.免疫磁珠分离与实时定量PCR技术联合检测水中轮状病毒的研究[J].环境科学,2009,30(5):1368-1375. |
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| 作者姓名： | 杨万 何苗 李丹 施汉昌 刘丽 |
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| 作者单位： | 清华大学环境科学与工程系,环境模拟与污染控制国家重点联合实验室,北京,100084 |
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| 基金项目： | 国家重点实验室专项基金项目(08Y01ESPCT) |
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| 摘 要： | 建立了一种免疫磁珠分离技术联合实时定量PCR快速定量检测水中轮状病毒的方法.通过制备能够分离水中轮状病毒的特异免疫磁珠，优化分离条件，建立了免疫磁珠分离前处理方法，并与逆转录、实时定量PCR结合，成功用于水中轮状病毒的检测.研究发现，在1 mL水样中加入10 μL轮状病毒免疫磁珠、0.25 μL Tween 20、孵育2 h可达到较好的分离效果；免疫磁珠可用于3%牛肉浸膏等常用病毒洗脱液中的轮状病毒的分离，表明该分离技术能与已有的病毒浓集方法良好地整合.免疫磁珠分离技术与实时定量PCR联合用于检测水中轮状病毒，全过程需时约5 h，检测限为1×104 copies/mL(相当于3～4 PFU/mＬ)，检测结果与细胞病变试验检测结果有良好的线性相关关系（R2=0.981 6），表明其能较好地表征水样的病毒感染风险.对接种已知量的轮状病毒的污水处理厂二级出水、再生水、地表水、自来水等水样的实验表明，该法可用于各种水样中轮状病毒的检测.
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| 关 键 词： | 免疫磁珠分离前处理 实时定量PCR 轮状病毒 环境水样 |
| 收稿时间： | 2008/6/10 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/8/14 0:00:00 |
Rapid Detection of Rotavirus in Water Samples Using Immunomagnetic Separation Combined with Real Time PCR |
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| YANG Wan,HE Miao,LI Dan,SHI Han-chang and LIU Li.Rapid Detection of Rotavirus in Water Samples Using Immunomagnetic Separation Combined with Real Time PCR[J].Chinese Journal of Environmental Science,2009,30(5):1368-1375. |
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| Authors: | YANG Wan HE Miao LI Dan SHI Han-chang and LIU Li |
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| Institution: | State Key Joint Laboratory of Environment Simulation and Pollution Control;Department of Environmental Science and Engineering;Tsinghua University;Beijing 100084;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | immunomagnetic separation real time polymerase chain reaction rotavirus water samples |
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