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快速检测软骨藻酸的间接ELISA方法
引用本文:刘淑娟,赵晓祥,程金平,王茜,王文华.快速检测软骨藻酸的间接ELISA方法[J].环境科学学报,2014,34(2):404-408.
作者姓名:刘淑娟  赵晓祥  程金平  王茜  王文华
作者单位:1. 上海交通大学 环境科学与工程学院, 上海 200240;2. 东华大学 环境科学与工程学院, 上海 201620;2. 东华大学 环境科学与工程学院, 上海 201620;1. 上海交通大学 环境科学与工程学院, 上海 200240;1. 上海交通大学 环境科学与工程学院, 上海 200240;1. 上海交通大学 环境科学与工程学院, 上海 200240
基金项目:海洋赤潮灾害立体监测技术与应用国家海洋局重点实验室开放研究基金(No.MATHAB20120101)
摘    要:分别对抗原、一抗、二抗的最佳稀释倍数、温育温度与时间、包被条件及其显色条件进行了优化,建立了一种快速检测软骨藻酸(Domoic acid,DA)的酶联免疫分析法(ELISA).结果表明:抗原、一抗和二抗(HRP-IgG)最佳稀释度分别为1∶12800倍、1∶400倍和1∶3000倍;最佳包被条件为4℃包被12 h;抗原抗体最佳反应温度为37℃,反应时间为60 min;二抗最佳反应温度为43℃,反应时间为30 min;最佳显色条件为室温不避光显色20 min.该方法的样品加标回收率高达86.8%~103.2%,其最低检测限(LOD)为4.86 ng·mL-1,光吸收值(OD值)的变异系数(CV)在2.46%~7.08%之间.

关 键 词:软骨藻酸  间接竞争ELISA法  快速检测
收稿时间:2013/6/29 0:00:00
修稿时间:9/2/2013 12:00:00 AM

Establishment of indirect ELISA to detect domoic acid
LIU Shujuan,ZHAO Xiaoxiang,CHENG Jinping,WANG Qian and WANG Wenhua.Establishment of indirect ELISA to detect domoic acid[J].Acta Scientiae Circumstantiae,2014,34(2):404-408.
Authors:LIU Shujuan  ZHAO Xiaoxiang  CHENG Jinping  WANG Qian and WANG Wenhua
Institution:1. School of Environmental Science and Engineering, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240;2. College of Environmental Science and Engineering, Donghua University, Shanghai 201620;2. College of Environmental Science and Engineering, Donghua University, Shanghai 201620;1. School of Environmental Science and Engineering, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240;1. School of Environmental Science and Engineering, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240;1. School of Environmental Science and Engineering, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240
Abstract:
Keywords:domoic acid  indirect competitive ELISA  rapid detection
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