| 水中抑制物对定量PCR与膜过滤法检测E.coli的影响 |
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| 引用本文： | 徐丽梅,王晓昌,周进宏,吉铮,张崇淼.水中抑制物对定量PCR与膜过滤法检测E.coli的影响[J].环境工程学报,2015,9(2):609-614. |
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| 作者姓名： | 徐丽梅 王晓昌 周进宏 吉铮 张崇淼 |
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| 作者单位： | 西安建筑科技大学环境与市政工程学院,西北水资源与环境生态教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家“水体污染控制与治理”科技重大专项(2013ZX07310-001) |
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| 摘 要： | 针对水中病原微生物的污染,选择大肠埃希氏菌E.coli作为病原示踪剂,以E.coli染色体上β-葡萄糖醛酸酶uid A目的基因建立了SYBR Green实时荧光定量PCR的检测方法。该定量PCR方法灵敏度高,检测限可达104CFU/L,线性关系良好,相关系数为R2=0.999。研究表明,定量PCR与菌液浓度呈显著正相关R2=0.935。通过人工投加腐殖酸、COD,研究了水中抑制物对定量PCR和膜过滤MF培养法的影响。结果显示,腐殖酸可使E.coli在培养皿上的菌落变小聚集,且显色不明显,当腐殖酸量为20 mg/L时,浓度为50 CFU/100 m L的E.coli完全受到抑制,没有菌落出现。腐殖酸对PCR扩增的抑制作用明显,当腐殖酸浓度增加到10 mg/L,定量PCR检测结果基因拷贝数减少约1 log,增加到20 mg/L定性PCR检测结果为阴性。
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| 关 键 词： | E.coli 实时荧光定量PCR 膜过滤 腐殖酸 抑制作用 |
Effect of inhibitors in water on detection of Escherichia coil by quantitative PCR and membrane filtration method |
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| Xu Limei;Wang Xiaochang;Zhou Jinhong;Ji Zheng;Zhang Chongmiao.Effect of inhibitors in water on detection of Escherichia coil by quantitative PCR and membrane filtration method[J].Techniques and Equipment for Environmental Pollution Control,2015,9(2):609-614. |
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| Authors: | Xu Limei;Wang Xiaochang;Zhou Jinhong;Ji Zheng;Zhang Chongmiao |
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| Institution: | Xu Limei;Wang Xiaochang;Zhou Jinhong;Ji Zheng;Zhang Chongmiao;Key Laboratory of Northwest Water Resources,Environment and Ecology,Ministry of Education,School of Environmental and Municipal Engineering,Xi’an University of Architecture and Technology; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | E coli real-time qPCR membrane filtration humic acid inhibition |
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