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实时定量RT-PCR方法检测雌二醇诱导原代培养青鳉鱼肝细胞的基因表达
引用本文:王琪,黄崇,张照斌,胡建英,张仁陟.实时定量RT-PCR方法检测雌二醇诱导原代培养青鳉鱼肝细胞的基因表达[J].环境科学学报,2008,28(12):2568-2572.
作者姓名:王琪  黄崇  张照斌  胡建英  张仁陟
作者单位:1. 甘肃农业大学资源与环境学院,兰州,730070;北京大学城市与环境学院,北京,100871
2. 北京大学城市与环境学院,北京,100871
3. 甘肃农业大学资源与环境学院,兰州,730070
基金项目:国家自然科学基金 , 国家重点基础研究发展规划(973计划)  
摘    要:利用原代培养的雄性青鳉鱼肝细胞进行了相同雌二醇(E2)浓度(100 nmol·L-1)下的不同时间(2、4、6、8d)和相同暴露时间(4d)下的不同浓度(1、10、100、1000、10000 nmol·L-1)的雌二醇(E2)实验,采用实时定量RT-PCR方法对青鳉鱼VTG-Ⅰ、VTG-Ⅱ、CHG-H、CHG-L和ERα的基因表达进行了研究,结果表明,VTG-Ⅰ、VTG-Ⅱ、CHG-H、CHG-L和ERα的基因表达与E2的暴露浓度呈现很好的剂量-效应关系,且1nmol·L-1E2暴露就能显著诱导肝细胞内VTG-Ⅰ、VTG-Ⅱ、CHG-H、CHG-L和ERα的基因表达.作为生物监测雌激素活性的in vitro方法,实时定量RT-PCR的灵敏度高于其它已经发表的方法.因此,实时定量RT-PCB方法与原代培养青鳉鱼肝细胞相结合的方法在环境雌激素效应的评价上具有很大地应用潜力.

关 键 词:实时定量RT-PCR  雌二醇  原代培养肝细胞  卵黄蛋白原  青鳉鱼
收稿时间:1/9/2008 11:23:50 AM
修稿时间:4/30/2008 2:42:03 PM
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