| 质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5－1A |
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| 引用本文： | 汪靖超,连福明,郭道森,李荣贵,赵博光.质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5－1A[J].应用与环境生物学报,2009,15(1). |
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| 作者姓名： | 汪靖超 连福明 郭道森 李荣贵 赵博光 |
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| 作者单位： | 1. 青岛大学生物系,青岛,266071
2. 南京林业大学森林环境与资源学院,南京,210037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目 |
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| 摘 要： | 以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300 mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01 ng/μL,在25 μF电容、9 kV/cm电场强度、200 Ω电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌的基因导入提供技术支持.为进一步通过基因敲除的方法,选择性地失活特定功能基因,进而确定这些基因在松材线虫病病理进程中的作用奠定基础.图2参16
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| 关 键 词： | 荧光假单胞菌GcM5-1A 电转化 转化效率 松材线虫 |
Transformation of Pseudomonasfluorescens GcM5-1A Carried by Pine Wood Nematode with Plasmid pACYC184 by Electroporation |
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| WANG Jingchao,LIAN Fuming,GUO Daosen,LI Ronggui,ZHAO Boguang.Transformation of Pseudomonasfluorescens GcM5-1A Carried by Pine Wood Nematode with Plasmid pACYC184 by Electroporation[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2009,15(1). |
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| Authors: | WANG Jingchao LIAN Fuming GUO Daosen LI Ronggui ZHAO Boguang |
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