苜蓿根瘤菌乙酰-CoA合成酶的过量表达、纯化及特性 |
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引用本文: | 戴美学,张成刚.苜蓿根瘤菌乙酰-CoA合成酶的过量表达、纯化及特性[J].应用与环境生物学报,2004,10(1):113-115. |
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作者姓名: | 戴美学 张成刚 |
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作者单位: | 1. 山东师范大学生命科学学院,济南,250014 2. 中国科学院沈阳应用生态研究所,沈阳,110015 |
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摘 要: | PCR扩增了苜蓿根瘤菌乙酰辅酶A合成酶编码基因 (acsA1) ,克隆到连接 -非依赖型载体pET30LIC ;在E .coliBL2 1(DE3)pLysS中得到了有效表达 ,表达需IPTG的诱导 ,诱导 3h达到酶活高峰 .采用His·Bind柱层析对ACS进行了纯化 ,纯化的酶蛋白经SDS-PAGE呈单一浓带 ,分子量约 72 0 0 0 ,具较高的酶活 ,是无细胞提取液的 12 .7倍 .酶动力学分析显示 ,Vmax、Km分别为 (4 13.6± 11.7)mmolL-1和 (5 .8± 0 .6 )mmolL-1.图 4表 2参 8
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关 键 词: | 苜蓿根瘤菌 乙酰辅酶A合成酶 过量表达 纯化 |
修稿时间: | 2003年3月14日 |
OVER-EXPRESSION,PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF ACETYL-CoA SYNTHETASE FROM SINORHIZOBIUM MELILOTI |
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Abstract: | |
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Keywords: | Sinorhizobium meliloti acetyl-CoA synthetase over-expresssion |
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