| 松材线虫PCR标准化阳性对照构建及检测体系的建立 |
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| 引用本文： | 刘裕兰,王中康,曹月青,夏玉先,殷幼平.松材线虫PCR标准化阳性对照构建及检测体系的建立[J].应用与环境生物学报,2008,14(1):122-125. |
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| 作者姓名： | 刘裕兰 王中康 曹月青 夏玉先 殷幼平 |
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| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院/重庆市杀虫真菌生物农药工程技术中心/重庆市高校基因功能与调控重点实验室,重庆,400044 |
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| 基金项目： | 科技部科技型中小企业技术创新项目 |
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| 摘 要： | 建立了松材线虫PCR检测标准化阳性对照及特异性强的PCR检测体系.根据松材线虫rDNA-ITS区和BxPe12基因的特异基因序列设计引物,并从中筛选出一对特异引物cqubs01/cquba01,该引物能从松材线虫特异性扩增出196 bp片段,而不能对其他种类线虫进行扩增.基于优化PCR反应体系和反应程序,稳定的检测体系得以建立,检测灵敏度为100 ps/μL.以松材线虫基因组DNA为模板,以上述特异引物进行PCR扩增,将纯化后的PCR产物与PMD18-T载体连接之后转入大肠杆菌中,筛选出阳性克隆进行测序验证,最终获得了松材线虫的无害化阳性对照,建立了松材线虫标准化阳性对照的PCR检测体系.对来自于不同地区的12批次近100个样品进行了实际检测验证,其结果与实际发生情况一致,说明本检测体系稳定可靠.图3表2参8
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| 关 键 词： | 松材线虫 阳性对照 PCR检测 引物 松材线虫 标准化 阳性对照 检测体系 System Detection Control Positive Standard 体系稳定 发生情况 结果 样品 批次 地区 无害化 验证 测序 阳性克隆 大肠杆菌 |
| 收稿时间： | 2007-01-15 |
| 修稿时间： | 2007-05-25 |
Establishment of Standard Positive Control and PCR Detection System for Bursaphelenchus xylophilus |
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| LIU Yulan,WANG Zhongkang,CAO Yueqing,XIA Yuxian,YIN Youping.Establishment of Standard Positive Control and PCR Detection System for Bursaphelenchus xylophilus[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2008,14(1):122-125. |
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| Authors: | LIU Yulan WANG Zhongkang CAO Yueqing XIA Yuxian YIN Youping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bursaphelenchus xylophilus positive control PCR detection primer |
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