| R-工程菌表达产物酯酶B1的纯化及其特性 |
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| 引用本文： | 孙中涛,闫艳春,姚良同,田林茂.R-工程菌表达产物酯酶B1的纯化及其特性[J].安全与环境学报,2003,3(6):31-35. |
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| 作者姓名： | 孙中涛 闫艳春 姚良同 田林茂 |
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| 作者单位： | 山东农业大学生命科学学院,山东,泰安,271018 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金;Y98D16064; |
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| 摘 要： | 为将酯酶B1应用于果蔬农药残留的降解,对其进行分离纯化,并对其酶学特性进行研究。R-工程菌在LB液体培养基中37℃震荡培养14 h,细胞经石英砂冰浴研磨破壁,粗提酶液经硫酸铵分级盐析、Sephadex G-50分子筛柱层析脱盐、DEAE-Sepharose FastFlow离子交换层析、Sephadex G-75分子筛柱层析得到凝胶电泳均一的酯酶B1。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量为67 kDa。酯酶B1的纯化倍数为43.4,收率为2.94％。该酶的最佳作用条件是37℃、pH=7.O,常温(25℃)下,酯酶B1的半衰期为62 h,42℃时该酶仍然十分稳定。酶促反应动力学曲线采用双倒数法,37℃时最大酶促反应速度Vm=0.73 mg/(mL·min),米氏常数Km=3.89 mg/mL。酯酶B1活力强、在常温下反应速度快、稳定高,说明其用于果蔬农残降解在技术上是可行的。本文将酯酶B1纯化至电泳纯,因而工艺复杂、收率较低,但在实际应用中,只需进行粗分离,工艺简单,收率高达70％,因此,该酶的开发应用在经济上也是可行的。
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| 关 键 词： | 酶工程 酯酶B1 分离 纯化 酶学特性 半衰期 R-工程菌 农药残留 生物降解 |
| 文章编号： | 1009-6094(2003)06-0031-05 |
| 修稿时间： | 2003年5月7日 |
A RESEARCH ON PURIFICATION AND PROPERTIES OF ESTERASE B1 FROM R-ENGINEERED BACTERIA |
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| SUN Zhong-tao,YAN Yan-chun,YAO Liang-tong,TIAN Lin-mao.A RESEARCH ON PURIFICATION AND PROPERTIES OF ESTERASE B1 FROM R-ENGINEERED BACTERIA[J].Journal of Safety and Environment,2003,3(6):31-35. |
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| Authors: | SUN Zhong-tao YAN Yan-chun YAO Liang-tong TIAN Lin-mao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | enzyme engineering esterase Bl purification engineered bacteria enzymatic property half-life |
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