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实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻
引用本文:徐恒省,李继影,刘孟宇,景明.实时荧光定量聚合酶链反应快速检测产毒铜绿微囊藻[J].中国环境监测,2013,29(4):89-93.
作者姓名:徐恒省  李继影  刘孟宇  景明
作者单位:苏州市环境监测中心站, 江苏 苏州 215004;苏州市环境监测中心站, 江苏 苏州 215004;苏州市环境监测中心站, 江苏 苏州 215004;苏州市环境监测中心站, 江苏 苏州 215004
基金项目:国家水体污染控制与治理科技重大专项(2008ZX07313-007)。
摘    要:以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)产毒株微囊藻毒素合成酶基因(mcyA)为靶序列设计了一对特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)方法,对铜绿微囊藻进行了定性定量检测。结果表明,仅含铜绿微囊藻脱氧核糖核酸(DNA)模板的样品有扩增,对照组小球藻(Chlorella)没有检测到扩增信号;扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为(83±1)℃,证明该聚合酶链反应扩增产物极为特异。以重组质粒pMD-18T-mcyA为标准品,所得标准曲线具有高度线性相关性,重复性好,符合制备实时定量聚合酶链反应标准曲线的要求。利用该方法建立的标准曲线对实验室培养获得的铜绿微囊藻DNA样品进行定量检测,与显微镜计数结果基本一致。

关 键 词:铜绿微囊藻  实时荧光定量聚合酶链反应  微囊藻毒素合成酶基因  定量检测
收稿时间:2011/12/6 0:00:00
修稿时间:6/4/2012 12:00:00 AM

Development of a Real-Time PCR Assay for Rapid Detection and Quantification of Microcystis Aeruginosa
XU Heng-sheng,LI Ji-ying,LIU Meng-yu and JING Ming.Development of a Real-Time PCR Assay for Rapid Detection and Quantification of Microcystis Aeruginosa[J].Environmental Monitoring in China,2013,29(4):89-93.
Authors:XU Heng-sheng  LI Ji-ying  LIU Meng-yu and JING Ming
Institution:Suzhou Environmental Monitoring Central Station, Suzhou 215004, China;Suzhou Environmental Monitoring Central Station, Suzhou 215004, China;Suzhou Environmental Monitoring Central Station, Suzhou 215004, China;Suzhou Environmental Monitoring Central Station, Suzhou 215004, China
Abstract:
Keywords:Microcystis aeruginosa  Real-time PCR  mcyA  quantitive identification
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