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利用唐鱼雌激素受体构建环境雌激素重组酵母测评系统的研究
引用本文:陈美玲,刘琳,杨志兵,武佳韵,黄儒强,李赞,凌源智,曾健辉,马广智.利用唐鱼雌激素受体构建环境雌激素重组酵母测评系统的研究[J].环境科学学报,2015,35(1):317-323.
作者姓名:陈美玲  刘琳  杨志兵  武佳韵  黄儒强  李赞  凌源智  曾健辉  马广智
作者单位:华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;厦门大学生命科学学院, 厦门 361102;四川大学生命科学学院, 成都 610064;华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;1. 华南师范大学生命科学学院, 广州 510631;2. 广东科学技术职业学院, 珠海 519090
基金项目:广东省科技计划项目(No.20120401)
摘    要:利用唐鱼雌激素受体基因片段构建重组酵母,用以筛选环境雌激素类化学物质.实验先将唐鱼雌激素受体terα基因片段插入载体pGADT7中构建表达质粒p GADT7/TERα,同时将雌激素效应元件(ere)片段插入pMP206载体中构建报告质粒pMP206/ERE-Lac Z;然后把表达质粒和报告质粒共转化到酵母AH109中,经筛选成功构建了由唐鱼雌激素受体调控的表达lac Z基因的重组酵母AHpTERα/ERE.结果表明,所构建的重组酵母AHpTERα/ERE在不同浓度17β-雌二醇(E2)的诱导下,β-半乳糖苷酶的活性呈现出明显的剂量-效应关系,其EC50为(0.521±0.700)nmol·L-1.与DMSO对照组相比,重组酵母在17β-雌二醇诱导下有明显的β-半乳糖苷酶活性增强的现象.在不同浓度17α-乙炔基雌二醇(EE2)、壬基酚(NP)及其混合物、双酚A(BPA)、17β-雌二醇(E2)(阳性对照)的诱导下,重组酵母均呈现出剂量-效应关系,且灵敏度大小为E2EE2NPBPA.结果表明,本研究成功构建了重组基因酵母测评系统,初步判定该重组酵母可应用于环境雌激素的筛选.

关 键 词:唐鱼  环境雌激素  重组酵母评测系统  雌激素受体  β-半乳糖苷酶
收稿时间:2014/3/10 0:00:00
修稿时间:5/6/2014 12:00:00 AM

Recombinant yeast assay system for environmental estrogens mediated by estrogen receptor from Tanichthys albonubes
CHEN Meiling,LIU Lin,YANG Zhibing,WU Jiayun,HUANG Ruqiang,LI Zan,LING Yuanzhi,ZENG Jianhui and MA Guangzhi.Recombinant yeast assay system for environmental estrogens mediated by estrogen receptor from Tanichthys albonubes[J].Acta Scientiae Circumstantiae,2015,35(1):317-323.
Authors:CHEN Meiling  LIU Lin  YANG Zhibing  WU Jiayun  HUANG Ruqiang  LI Zan  LING Yuanzhi  ZENG Jianhui and MA Guangzhi
Institution:College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;College of Life and Science, Xiamen University, Xiamen 361102;College of Life and Science, Sichuan University, Chengdu 610064;College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;1. College of Life and Science, South China Normal University, Guangzhou 510631;2. Guangdong Institute of Science and Technology, Zhuhai 519090
Abstract:
Keywords:Tanichthys albonubes  environmental estrogens  recombinant yeast assay  estrogen receptor  beta-galactosidase
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