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| 猴金属硫蛋白α域(MT-α cDNA)突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附 | |
| 引用本文： | 路延笃,黄巧云,陈雯莉,雷磊,何小川,蔡鹏,梁巍.猴金属硫蛋白α域(MT-α cDNA)突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附[J].环境科学学报,2008,28(9):1763-1770. |
| 作者姓名： | 路延笃 黄巧云 陈雯莉 雷磊 何小川 蔡鹏 梁巍 |
| 作者单位： | 1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;中国科学院烟台海岸带可持续发展研究所,烟台,264003;中国科学院海洋研究所,青岛,266071 2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学农业部亚热带农业资源与环境重点开放实验室,武汉,430070 3. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070 4. 华中农业大学农业部亚热带农业资源与环境重点开放实验室,武汉,430070 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，高等学校博士学科点专项科研项目 |
| 摘 要： | 采用PCR技术和同尾酶手段,构建了猴金属硫蛋白(mMT)α域的串连体,并构建了表达MT α串连体的工程菌,获得了表达二聚串连体(MTα2)、三聚串连体(MTα3)、五聚串连体(MTα5)的工程菌.结果表明,工程菌在0.1 mmol·L-1IPTG诱导3h后表达量最高.Cd2 浓度为0.5mmol·L-1时,对照菌pGEX-2T/BL21生长受到严重胁迫,工程菌表现出较强的抗性,MTαn/BL21(n=2、3、5)生长几乎不受到胁迫;Cd2 浓度为1.0 mmol·L-1时,MTα5/BL21表现出较强的耐受能力.Cd2 浓度为0.5 mmol·L-1时,工程菌对镉的富集能力明显高于对照,其中富集能力最强的是MTα3/BL21(76%).与对照pGEX-2T/BL21相比,MT/BL21对锌吸附能力显著提高.而转化有MTα串连体基因的工程菌对锌的吸附能力没有提高,说明工程菌对Cd2 的吸附特异性增强.结构预测显示,MTα、MTα2、MTα,的二级结构中α螺旋依次增加,推测突变蛋白的疏水性增强,三维结构稳定.MTα4、MTα5二级结构中,α螺旋数目减少,尤其是MTa5,其a螺旋几乎完全遭到破坏,疏水性大为降低.对基因工程菌吸附镉的实验表明,MTα3/BL21对镉具有较高的特异性和富集容量. |
| 关 键 词： | 猴金属硫蛋白 重金属 抗性 吸附 串连体 |
| 收稿时间： | 9/2/2007 8:46:34 PM |
| 修稿时间： | 1/14/2008 5:09:59 PM |
Construction and expression of metallothionein mutations and the heavy-metal adsorption capacity of the engineered bacteria |
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| LU Yandu,HUANG Qiaoyun,CHEN Wenli,LEI Lei,HE Xiaochuan,CAI Peng and LIANG Wei.Construction and expression of metallothionein mutations and the heavy-metal adsorption capacity of the engineered bacteria[J].Acta Scientiae Circumstantiae,2008,28(9):1763-1770. | |
| Authors: | LU Yandu HUANG Qiaoyun CHEN Wenli LEI Lei HE Xiaochuan CAI Peng and LIANG Wei |
| Institution: | 1. State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070; 2. Yantai Institute of Coastal Zone Research for Sustainable Development, Chinese Academy of Science, Yantai 264003; 3. Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071,1. State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070; 2. Key Laboratory of Subtropical Agriculture & Environment of Ministry of Agriculture, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,Key Laboratory of Subtropical Agriculture & Environment of Ministry of Agriculture, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070 and Key Laboratory of Subtropical Agriculture & Environment of Ministry of Agriculture, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070 |
| Abstract: | |
| Keywords: | SWISS-MODEL |
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