厌氧氨氧化活性污泥DNA高效提取方法探究 |
| |
引用本文: | 倪敏,李祥,刘婷婷,毕贞,潘杨.厌氧氨氧化活性污泥DNA高效提取方法探究[J].环境科学与技术,2019,42(10):83-87. |
| |
作者姓名: | 倪敏 李祥 刘婷婷 毕贞 潘杨 |
| |
作者单位: | 苏州科技大学江苏省环境科学与工程重点实验室,江苏苏州 215009;苏州科技大学环境科学与工程学院,江苏苏州 215009;苏州科技大学环境科学与工程学院,江苏苏州 215009 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金;江苏省自然科学基金;苏州科技大学校基金 |
| |
摘 要: | 为了揭示自动和手动抽提方法所得DNA的差异,分析该差异所造成的本质原因,探求提高厌氧氨氧化(Anammox)活性污泥DNA抽提效率的方法;通过不同人员自动和手动抽提Anammox活性污泥,比较DNA得率与质量,发现手动抽提DNA浓度显著高于自动抽提(P0.05)、DNA质量与自动提取结果无显著差异(A260/280值在1.8~2.0之间);比较不同人员抽提效率,结果表明自动抽提DNA浓度和质量稳定性高于手动抽提。通过调整自动抽提裂解液、洗脱液、污泥用量优化自动提取过程,发现350 mg活性污泥(13 000r/min离心3 min)、900μL裂解液、100μL洗脱液提取的DNA效率最高,是自动提取的最优使用量,对DNA抽提效率的影响由大到小依次为洗脱液、污泥用量、裂解液。综上,手动抽提用于杂质含量少、微生物丰度低的样品,误差较小,自动抽提用于杂质繁杂、微生物富集较好的样品,抽提稳定性较高。
|
关 键 词: | 厌氧氨氧化活性污泥 自动抽提 手动抽提 提取效率 |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
|