水稻幼穗分化特异性启动子pRFL的克隆和特征分析 |
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引用本文: | 苏军,林智敏,刘霞,胡太蛟,李刚,颜静宛.水稻幼穗分化特异性启动子pRFL的克隆和特征分析[J].应用与环境生物学报,2016(4):675-679. |
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作者姓名: | 苏军 林智敏 刘霞 胡太蛟 李刚 颜静宛 |
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作者单位: | 福建省农业科学院生物技术研究所,福建省农业遗传工程重点实验室 |
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基金项目: | 福建省科技计划项目(2015N0103);省属公益类科研院所科研专项(2014R1019-1)资助~~ |
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摘 要: | 组织特异性启动子能够驱动基因在特定的时期和部位表达,克服组成型启动子启动的外源基因在受体植物中非特异、持续、高效表达所造成的浪费,是基因工程技术最重要元件之一.本研究利用PCR技术从水稻基因组中克隆了幼穗分化特异表达基因RFL翻译起始位点上游2 001 bp的启动子序列,命名为pRFL.生物信息分析显示,该片段含有36个转录起始核心启动子元件TATA-box和多个启动子增强子区顺式作用元件CAAT-box,以及多个光反应调控元件和植物激素响应元件等.将其与GUS基因构建成植物表达载体,导入水稻"日本晴",组织化学染色法检测显示,转基因水稻植株叶片、茎均无GUS显色,花序及发育中的小花有较强表达;荧光定量PCR测定幼穗GUS基因转录活性,显示pRFL驱动的GUS基因表达量比actin启动子驱动的GUS基因表达量高2.9倍.上述结果初步证明了pRFL为幼穗分化特异性启动子.
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关 键 词: | 水稻 幼穗分化 特异性启动子 克隆 特征分析 |
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