| 用单个特异引物扩增桃ACC氧化酶cDNA及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 金勇丰,张耀洲,陈大明,张上隆.用单个特异引物扩增桃ACC氧化酶cDNA及其在大肠杆菌中的表达[J].应用与环境生物学报,1999,0(1):55-59. |
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| 作者姓名： | 金勇丰 张耀洲 陈大明 张上隆 |
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| 作者单位： | 1. 浙江农业大学园艺系,杭州310029
2. 浙江农业大学生物化学研究所 |
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| 基金项目： | 国家和浙江省自然科学基金,农业部“九五”重点课题 |
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| 摘 要： | 用单个特异引物和通用引物ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５从桃受伤叶片ｃＤＮＡ中扩增出１．３ｋｂ左右大小的片段．将该扩增产物克隆并对重组克隆作酶切分析发现至少可分为３类．用桃ＡＣＣ氧化酶基因组ＤＮＡ为探针进行点杂交表明，４，７，９，１０，１１，１２重组质粒能与之杂交，其中７，９，１０，１１，１２号重组质粒酶切图谱与已报导的桃果实成熟相关的ＡＣＣ氧化酶ｃＤＮＡ基因基本一致，而４号克隆则不同．ＤＮＡ序列分析和ＰＣＲ鉴定表明，插入片段均由５′端特异引物单个引物扩增出来，对７号重组克隆插入片段ＤＮＡ全序列分析表明，７号重组克隆插入片段全长１１４６ｂｐ，包含了除启始密码子外的全部编码区和１９２ｂｐ的３′端非编码区．通过补上起始密码子ＡＴＧ构建重组表达载体，在大肠杆菌中表达出３５×１０３的非融合蛋白
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| 关 键 词： | 桃（Prunuspersica） 单个特异引物 ACC氧化酶基因 克隆 表达 |
Amplification of Peach ACC Oxidase cDNA by Single Specific Primer and Expression in E.ColiJin |
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| Yongfeng,Zhang Yaozhou,Chen Daming,Zhang Shanglong.Amplification of Peach ACC Oxidase cDNA by Single Specific Primer and Expression in E.ColiJin[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,1999,0(1):55-59. |
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| Authors: | Yongfeng Zhang Yaozhou Chen Daming Zhang Shanglong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Prunus persica Single specific primer ACC oxidase gene Cloning Expression |
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