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费氏中华根瘤菌lrp基因的克隆、突变与功能
引用本文:陈钢,唐美琼,孙云,许兢,武波.费氏中华根瘤菌lrp基因的克隆、突变与功能[J].应用与环境生物学报,2008,14(5).
作者姓名:陈钢  唐美琼  孙云  许兢  武波
作者单位:1. 微生物及植物遗传工程教育部重点实验室广西大学生命科学与技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁,530005;桂林师范高等专科学校,广西桂林,541002
2. 微生物及植物遗传工程教育部重点实验室广西大学生命科学与技术学院广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁,530005
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),国家自然科学基金
摘    要:通过分子克隆技术,从费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01基因组文库中克降到一个lrp基因.该基因与已报道的苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021的lrp基因在核苷酸水平上有89%相似性,在氨基酸水平上有99%相似性.利用自杀质粒pK18mob构建含有lrp基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合后导入原始菌株HN01中,经过同源单交换,获得发生正向插入突变的突变株GXHNLTA和反向插入突变的突变株GXHNLTB.将lrp基因ORF连接到载体pLAFR3上,获得用于互补的质粒pGXHNL100,将该质粒通过三亲本接合导入突变株中,获得互补株GXHNWA、GXHNWB.对野生型菌株、突变株、互补株进一步研究发现,在以脯氨酸、亮氨酸、丝氨酸等氨基酸为唯一碳、氮源的MM培养基中培养时,突变体GXHNLTA、GXHNLTB的生长均滞后于出发菌株HN01.植株试验表明,突变菌株GXHNLTA、GXHNLB比野生菌株HN01开始结瘤的时间提前1 d,在结瘤效率、单株瘤数、瘤重、固氮酶活性方面并无显著差别.

关 键 词:lrp基因  突变  植株试验

Mutation and Function of lrp Gene Cloned from Sinorhizobium fredii HN01
CHEN Gang,TANG Meiqiong,SUN Yun,XU Jing,WU bo.Mutation and Function of lrp Gene Cloned from Sinorhizobium fredii HN01[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2008,14(5).
Authors:CHEN Gang  TANG Meiqiong  SUN Yun  XU Jing  WU bo
Abstract:
Keywords:Sinorhizobium fredii HN01  pK18mob
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