| 中药青蒿鲨烯合酶的大肠杆菌表达、纯化与功能鉴定 |
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| 引用本文： | 李振秋,王花红,王红,李国凤,叶和春.中药青蒿鲨烯合酶的大肠杆菌表达、纯化与功能鉴定[J].应用与环境生物学报,2007,13(3):309-312. |
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| 作者姓名： | 李振秋 王花红 王红 李国凤 叶和春 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学院重点实验室,北京,100093;河北大学生命科学学院,河北保定,071001;中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学院重点实验室,北京,100093 |
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| 摘 要： | 利用PCR方法,将经RACE方法克隆到的中药青蒿鲨烯合酶cDNA(AF302464)开放阅读框的3′末端截短99bp,插入到原核表达载体pET30a( )的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的鲨烯合酶重组表达载体pETSSA.将pETSSA转入大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG(isopropyl-beta-D-thiogalactoside)28℃诱导重组鲨烯合酶的表达.表达产物经镍琼脂糖柱纯化.纯化蛋白加入酶促反应体系(含FPP和NADPH),GC-MS分析酶促反应体系的正己烷萃取物,结果显示重组鲨烯合酶可以催化FPP向鲨烯的转化.青蒿鲨烯合酶的功能鉴定为进一步利用反义或RNAi技术限制甾类生物合成,从而提高青蒿中的青蒿素含量提供了基础.图5参15
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| 关 键 词： | 鲨烯合酶 大肠杆菌表达 功能鉴定 青蒿 |
| 收稿时间： | 2006-05-09 |
| 修稿时间： | 2006-05-092006-08-11 |
Escherichia coli Expression, Purification and Functional Identification of Squalene Synthase from Artemisia annua L. |
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| LI Zhenqiu,WANG Huahong,WANG Hong,LI Guofeng,YE Hechun.Escherichia coli Expression, Purification and Functional Identification of Squalene Synthase from Artemisia annua L.[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2007,13(3):309-312. |
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| Authors: | LI Zhenqiu WANG Huahong WANG Hong LI Guofeng YE Hechun |
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| Institution: | 1 Key Laboratory of Photosynthesis and Environmental Molecular Physiology, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093, China; 2 College of Life Sciences, Hebei University, Baoding 071002, Hebei, China;3 Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | squalene synthase Escherichia coli expression functional identification Artemisia annua L |
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