| 碱性果胶酯裂解酶基因工程菌Pichia pastoris诱导表达条件初步优化 |
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| 引用本文： | 诸葛斌,堵国成,诸葛健,陈坚.碱性果胶酯裂解酶基因工程菌Pichia pastoris诱导表达条件初步优化[J].应用与环境生物学报,2008,14(4). |
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| 作者姓名： | 诸葛斌 堵国成 诸葛健 陈坚 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院环境生物技术研究室,工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214122 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 在摇瓶水平上,采用单因素试验方法,对影响碱性果胶酯基因工程菌Pichia pastoris表达的主要因素进行研究.确定初始甲醇浓度、甲醇补加量和氮源酵母氮基(YNB)浓度3个主要影响因素的初步优化结果为5%、O.8%和1.3%.在此基础上,利用响应面分析法进一步优化.经优化,表达条件为初始甲醇浓度4.35%、甲醇补加量0.75%1:2及YNB浓度1.31%,优化后碱性果胶酯裂解酶(PL)表达量达到40.6 U/mL,较初始培养条件提高约2.3倍.同时,利用SDS-PAGE电泳对优化前后基因工程菌表达情况进行分析,结果同样表明胞外FI标蛋白PL表达量有明显增加,进一步证实条件优化后对目标蛋白PL分泌表达具有十分明显的促进作用.
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| 关 键 词： | 碱性果胶酯裂解酶 基因工程菌 表达 优化 |
Optimization of Culture Conditions for Alkaline Pectate Lyase Production by Recombinant Pichia pastoris |
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| ZHUGE Bin,DU Guocheng,ZHU GEJian,CHEN Jian.Optimization of Culture Conditions for Alkaline Pectate Lyase Production by Recombinant Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2008,14(4). |
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| Authors: | ZHUGE Bin DU Guocheng ZHU GEJian CHEN Jian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichiapastoris |
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