DacD过量表达对大肠杆菌胞外蛋白生产的影响

大肠杆菌(Escherichia coli)是广泛用于重组蛋白表达的宿主之一,但缺乏高效的蛋白胞外分泌机制,为提高其胞外蛋白生产水平,分析D,D-羧肽酶DacD过量表达对E. coli胞外蛋白生产水平的影响.结果表明,与对照株相比,过量表达DacD时重组E. coli BL21(DE3)的重组绿色荧光蛋白(GFP)的胞外生产水平提高了1.6倍.同时,当过量表达DacD时,E. coli BL21的重组淀粉酶胞外生产水平较对照株提高了2.6倍.进一步研究发现,DacD的过量表达可促进E.coli BL21细胞内可溶性肽聚糖的积累.过量表达DacD也增强了E. coli BL21细胞内膜的通透性. DacD过量表达导致了E.coli BL21细胞形态的变化,重组菌株细胞两端形成了透明的球状囊泡结构.因此,通过过量DacD提高E. coli胞外蛋白生产水平是可行的.