| 转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质 |
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| 引用本文： | 李兴德,路英华.转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质[J].应用与环境生物学报,1996(4). |
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| 作者姓名： | 李兴德 路英华 |
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| 作者单位： | 中国学科院成都生物研究所，华东师范大学生物系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,中国科学院成部地奥科学基金 |
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| 摘 要： | 成熟蕃茄匀浆后，经硫酸铵盐析，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析，ＳｅｐａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ－Ａｇａｒｏｓｅ亲和层析，获得了α－Ｄ－半乳糖苷酶（Ｃ．Ｅ．３．２．１．１１）。酶制剂经ＰＡＧＥ检测为一条带；ＳＤＳ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得酶Ｍｒ为３４０００；比活力５２．９Ｕ／ｍｇ·；提纯倍数为５２９０１产率为４５％．酶专－催化以α－Ｄ－半乳糖为末端ａ－（１，３）连接的糖苷键，以ＰＮＰＧ（对硝基苯－α－Ｄ－半乳糖昔）为废物，酶催化反应的Ｋｍ＝０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为６７μｍｏｌ·ｍｇ１－·ｍｉｎ－１．ｔ稳定范是０～３５℃；ＰＨ稳定范围是４．０～７．０．最适ｐＨ为５．１．半乳糖是酶的竞争性抑制剂；Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｇ＋和ＥＤＴＡ对酶活性无影响．纯酶制剂可作为Ｂ型血向Ｏ型血转化的工具酶液．
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| 关 键 词： | 血型转化 蕃茄 α－D－半乳糖苷酶 分离纯化 理化性质 |
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