| 马氏甲烷八叠球菌S－6的一个染色体区段的表达、序列分析和结构分析 |
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| 引用本文： | 姚蓉.马氏甲烷八叠球菌S－6的一个染色体区段的表达、序列分析和结构分析[J].应用与环境生物学报,1996(1). |
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| 作者姓名： | 姚蓉 |
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| 作者单位： | Wadsworth Cester for Laboratories and Research，New York State Department of Health，and Department of Biomedical Sciences，School of Public Health，the University at Albang，Albany，New York 12201-0509 |
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| 摘 要： | 用一组多克隆抗体对马氏甲烷八叠球菌（Ｍｅｔｈａｎｏｓａｒｃｉｎａｍａｚｅｉ）Ｓ－６菌株的基因组ＤＮＡ文库进行了筛选．仅选出ｐ６０Ａ克隆能对马氏甲烷八叠球菌中可发生细胞形态学变化菌株的抗血清发生阳性反应．对ｐ６０Ａ克隆的双链ＤＮＡ进行了序列分析．识别出一开式阅读框架（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅＰ，ＯＲＦＰ）．表达的蛋白是ＯＲＦＰ编码的蛋白的３倍，并得到ＯＲＦＰ蛋白的三聚体，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现出整体蛋白的迁移行为．同时，此表达蛋白抗１０％ＳＤＳ，６ｍｏｌ／Ｌ尿素及热处理．基因结构分析表明，ＯＲＦＰ具有与Ｍ．ｂａｒｋｒｉｍｃｒＡ有同源性的核糖体结合位点和一个与甲烷细菌启动子共有序列相似度达７７％的启动子序列．使用参照序列分析表明，由ＯＲＦＰ演绎的氨基酸序列，具有高密度的带电荷的氨基酸和占优势的β－层迭构型．对此表达蛋白作了Ｎｅｕｒｏｓｒｏｒａｃｒａｓｓａ的ｐｏｒｉｎ蛋白抗血清试验，以研究其可能功能．检验了Ｍ．ｍａｚｅｉＳ－６细胞的蔗糖梯度制备物，对此原细胞中的ＯＲＦＰ蛋白作了定位．结果表明，ＯＲＦＰ蛋白可能是一种古细菌Ｐｏｒｉｎ，其在Ｍ．ｍａｚｅｉＳ－６中的表达，可能象大肠杆菌那样与渗透压调节有关．
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| 关 键 词： | 古细菌，Methanosarcinamazei，表达，DNA序列分析，DNA结构分析，Southern杂交分析，蔗糖梯度亚结构 |
EXPRESSION,SEQUENCING AND STRUCTURE ANALYSIS OF A CHROMOSOMAL REGION OF METHANOSARCINA MAZEI S-6 |
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| R. Yao,A. J. L. Macario and E. Conway de Macario.EXPRESSION,SEQUENCING AND STRUCTURE ANALYSIS OF A CHROMOSOMAL REGION OF METHANOSARCINA MAZEI S-6[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,1996(1). |
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| Authors: | R Yao A J L Macario and E Conway de Macario |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | archaebacteria Methanosarcina mazei DAN sequencing sequence analysis Southern blot analysis sucrose ultrastructure fractionation |
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