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一株多菌灵降解菌NY97-1的分子鉴定及GFP标记
引用本文:张丽珍,马利平,乔雄梧,郝变青,王静.一株多菌灵降解菌NY97-1的分子鉴定及GFP标记[J].应用与环境生物学报,2006,12(4):555-558.
作者姓名:张丽珍  马利平  乔雄梧  郝变青  王静
作者单位:1. 山西大学生命科学与技术学院,太原,030006;山西省农业科学院省农药重点实验室,太原,030031
2. 山西省农业科学院省农药重点实验室,太原,030031
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);山西省自然科学基金
摘    要:用PCR方法扩增的多菌灵降解菌NY97-1的16SrDNA片段经TA克隆后,进行序列测定和BLAST同源序列比较分析,确定了其分类地位为短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus,B.p).经BamHⅠ酶切的启动子探针载体pUC19-gfp与NY97-1基因组DNA的Sau3AⅠ酶切片段酶连,酶连产物转化E.coliDH5a,建立B.p的启动子基因文库.挑选其中的两个强阳性克隆,亚克隆来自短小芽孢杆菌总基因组的启动子活性片段F4、F5,构建大肠杆菌-短小芽孢杆菌穿梭表达载体pNW33N-F4-gfp、pNW33N-F5-gfp.通过电转化得到gfp在B.p中的两株标记菌株.在荧光显微镜下,观察到了明亮的绿色荧光,证明活性片段F4、F5均具有组成型启动子的功能,实现了gfp基因在B.p中组成型表达,且遗传稳定,为今后研究多菌灵降解菌B.p在自然环境中的定殖、分布及动态变化打下了基础.图3表2参20

关 键 词:多菌灵降解菌  16SrDNA  GFP  启动子基因文库  组成型穿梭表达载体  电转化
收稿时间:2005-07-19
修稿时间:2005-09-21

Identification of Carbendazim-Degrading NY97-1 Bacterium and Labeling by GFP
ZHANG Lizhen,MA Liping,QIAO Xiongwu,HAO Bianqing,WANG Jing.Identification of Carbendazim-Degrading NY97-1 Bacterium and Labeling by GFP[J].Chinese Journal of Applied and Environmental Biology,2006,12(4):555-558.
Authors:ZHANG Lizhen  MA Liping  QIAO Xiongwu  HAO Bianqing  WANG Jing
Institution:1 College of Life Sciences and Technology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China;2 Shanxi Key Laboratory of Pesticide Sciences, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Taiyuan 030031, China
Abstract:
Keywords:carbendazim-degrading bacterium  16S rDNA  GFP  promoter gene libraries  constitutive shuttle vector  electroporation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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