高灵敏度铜抗性酿酒酵母表达系统的构建与应用 |
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引用本文: | 盛冠一,诸葛斌,宗红,陆信曜,方慧英,宋健,诸葛健.高灵敏度铜抗性酿酒酵母表达系统的构建与应用[J].应用与环境生物学报,2014(3). |
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作者姓名: | 盛冠一 诸葛斌 宗红 陆信曜 方慧英 宋健 诸葛健 |
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作者单位: | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院工业微生物研究中心;江南大学化学与材料工程学院; |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(“863”计划)项目(2012AA021201,2011AA02A207)资助~~ |
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摘 要: | 利用PCR-mediated Technique对酿酒酵母W303-1A金属硫蛋白基因(cup1)进行敲除,获得一株铜离子敏感型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae W303-1A cup1△),其对Cu2+抑制浓度由1.2 mmol/L降为0.08 mmol/L;以pYX212载体为基本构架,以S.cerevisiae W303-1A cup1△为宿主菌,构建了以cup1作为筛选标记的pYX212M表达系统,并成功表达了绿色荧光蛋白基因(gfp),从而实现了高灵敏度铜抗性酿酒酵母表达系统的构建与应用.本研究构建的高灵敏度铜抗性酿酒酵母表达系统不仅廉价、安全,而且丰富了酵母的表达系统,同时对微生物的铜抗性机理及生物修复功能的研究具有指导意义.
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关 键 词: | 酿酒酵母 PCR-mediated Technique cup 铜抗性 绿色荧光蛋白 |
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