| 利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼bco1基因与bco1l基因 |
| |
| 引用本文： | 李文龙,冯永永,李凯彬,聂湘平,#.利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼bco1基因与bco1l基因[J].生态毒理学报,2018,13(3):138-145. |
| |
| 作者姓名： | 李文龙 冯永永 李凯彬 聂湘平 # |
| |
| 作者单位： | 暨南大学生命科学技术学院生态系/水生生物研究中心,广州,510632
中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州,510380 |
| |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目:鱼类实验动物新资源的开发与标准化研究(2015BAI09B05) |
| |
| 摘 要： | β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶(β-carotene-15,15'-momoxygenase 1,bco1)是β-胡萝卜素转化成维生素A过程中的关键酶,bco1与bco1l是编码此酶的主要基因。本实验利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼的与β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶编码相关的基因bco1与bco1l,以便深入开展对斑马鱼bco1的功能研究。分别在斑马鱼bco1与bco1l基因2号外显子选取sg RNA识别位点,体外转录制备sg RNA并与Cas9 m RNA混合对斑马鱼Ⅰ细胞期受精卵进行显微注射,24 h后收集部分胚胎进行PCR检测并将PCR产物进行单克隆测序确定sg RNA的有效性,构建首建鱼,并在此基础上通过PCR检测、凝胶电泳及测序筛选可遗传突变体。本研究分别获得了bco1基因突变与bco1l基因突变,分析表明这些缺失和插入均可导致编码序列的移码,为研究鱼类胡萝卜素代谢及相关发育过程等后续研究提供了材料。
|
| 关 键 词： | β-胡萝卜素-15 15′-加氧酶 斑马鱼 CRISPR/Cas9技术 基因敲除 |
| 收稿时间： | 2017/12/12 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/2/1 0:00:00 |
Next-generation Knock-out Technology of bco1 and bco1l Genes in Zebrafish by Using CRISPR/Cas9 System |
| |
| Li Wenlong,Feng Yongyong,Li Kaibin,Nie Xiangping,#.Next-generation Knock-out Technology of bco1 and bco1l Genes in Zebrafish by Using CRISPR/Cas9 System[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2018,13(3):138-145. |
| |
| Authors: | Li Wenlong Feng Yongyong Li Kaibin Nie Xiangping # |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生态毒理学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生态毒理学报》下载免费的PDF全文 |
|
