应用固化酶检测黄瓜中氨基甲酸酯类农药

通过向固定液中加入适量明胶构成BSA-GA-gelatin系统,从而对传统交联固化酶法进行了改进,不仅提高了固化乙酰胆碱酯酶的活性而且经固定化的乙酰胆碱酯酶具有较好的稳定性,在常温下保存45d后仍未见酶活性有明显下降.在研究过程中分别对BSA、GA、明胶的最佳浓度进行了考察,最佳使用浓度分别为5%、0.5%、和0.1%.把乙酰胆碱酯酶固定到96孔酶标板上并与酶标仪联用减少了因目视颜色变化带来的误差,提高了检测结果的准确性.针对以往农药残留速测法普遍采用的表面冲洗法进行农药残留提取的方法进行了改进,使提取效率大大提高,对大多数残留农药的提取效率可达到80%以上而且方法快速、简便.该方法用来检测氨基甲酸酯类农药具有简便、快速、准确、灵敏度较高的特点,对黄瓜中5种氨基甲酸酯类农药的检测灵敏度在0.1～0.2 mg/kg范围内.     

有机磷农药降解酶的研究进展

有机磷农药的不合理使用造成农药残留严重超标,对环境的污染及危害也日益严重,因此,有机磷农药降解方法的研究成为了当今的热点之一。本文综述了有机磷降解酶的发展及其基因工程的研究情况,对降解酶的应用现状进行了简要介绍,最后指出了有机磷降解酶技术未来的研究方向。     

免疫分析在环境监测中的应用

1 前言自从1960年出现免疫分析法之后,现已成为一种被广泛接受的分析方法,但主要是在临床化学方面。其在医学上的巨大成功,引起了各个领域许多分析工作者的兴趣。对于环境监测分析来说,也有许多值得研究、推广和发展的课题。免疫分析的原理为,已知抗原进入动物体内能产生抗体,所产生的抗体能与抗原进行特异性的结合。如果对抗原进行标记,则可以进行定量测定。非标记抗原和标记抗原皆趋向于和特异抗体的结合部位相结合,但首先是和非标记抗原即游离抗原相结合。此反应乃建立于质量作用定律的基础上。样品中的抗原越多,则标记抗原与抗体相结合的量就越少。当抗体和标记抗原的量保持恒定,则分析中唯一的变量便是抗原的浓度。如抗原     

基因工程技术在降解农药中的应用

综述基因工程技术:基因重组、原生质体融合、利用外源基因、降解酶和固相反应器等在降解农药中的研究进展,提出几种高效基因工程降解菌的构建策略和构建手段。     

单克隆抗体酶免疫分析法测定大米中杀虫脒残留量

用抗杀虫脒单克隆抗体为试剂,建立了间接竞争法,直接竞争法和标记抗原的竞争法等３种测定大米中杀生脒残留量的ＥＬＩＳＡ法,标准曲线上抑制率为５０％时对应的杀虫脒浓度分别为１．３、１．７和５．３ｎｇ／ｍｌ,大米样品用甲醇提到,提取液经吸附剂柱简单净化后即可用上述ＥＬＩＳＡ对痕量杀虫脒进行定量,使用直接竞争法时,样品加标回收率为９０％－１１６％,平行测定的相对标准偏差为５．１％－１６％,方法检出限为０．５     

检测水中有机磷农药的酶传感器

采用丝网印刷技术制作厚膜型电极,通过交联法将乙酰胆碱酯酶固定在电极上,开发快速检测水中有机磷农药的酶传感器.采用循环伏安法对电极所做的检测结果表明电极彼此间的差异在10%以内,具有较好的一致性.通过在交联剂、酶和底物等方面优化传感器的工作参数,确定了戊二醛、酶和底物的浓度分别为0.2%、0.5 mg/mL和10 mmol/L时,传感器响应最好.在交联固定酶的情况下,根据酶活受到有机磷抑制的原理,采用时间-电流法对特丁硫磷和对硫磷进行了检测.结果表明:这2种有机磷的检测限都可以达到1 ng/mL,线性区间1～10 000ng/mL.在物理吸附固定酶的情况下,采用循环伏安法对特丁硫磷进行了检测.结果表明:采用循环伏安法检测的灵敏度比采用时间-电流法的灵敏度要高.     

应用植物酯酶固化酶检测有机磷和氨基甲酸酯农药

选用聚苯乙烯微孔反应板作为酶的载体,将自制的植物酯酶固定在载体上的微孔内壁表面,制成农药快速检测板.采用酶抑制显色方法,检测有机磷和氨基甲酸酯类农药,其检测灵敏度在0 01～0 1mg·kg-1范围.该农药快速检测板为现场检测这两类农药提供了简便而快捷的方法.     

简易,快速检测有机磷农药的酶片的生色基质片

研制出简易、快速检测有机磷农药的酶片和生色基质片。用胆碱酯酶抑制试验检测水中的有机磷农药、检测灵敏度在０．０１￣１０ｍｇ／Ｌ范围，适宜温度在２５－３５℃之间，分析周期约为１５－２０ｍｉｎ。甲胺磷和水胺硫磷等硫代磷酸酯类农药经溴水活化后检测灵敏度也达上述水平。实际水样检测表明，检样中农药含量在检测灵敏度范围内时，阳性结果相当明显，溶液吸光度比值Ａ对照／Ａ检样〉２。由于检测时无需配制试剂和使用仪器，本     

菊酯类农药酶联免疫吸附测定研究进展

介绍了菊酯类农药残留的酶联免疫分析(ELISA)的技术原理、关键技术环节,综述了国内外的酶联免疫测定菊酯类农药残留的研究动态,并展望了此技术的发展及应用前景。     

利用EIA生物测试法快速定量筛选环境样品中的二噁污染物

将采集的环境样品分作 3份 ,1份用于高分辨色质联用多离子检测测定二噁的毒性当量浓度 TEQ,另 2份分别用 7-乙氧基 -异吩噁唑酮 -脱乙基酶 ( EROD)活力诱导法和酶免疫法 ( Enzyme Immuno Assay,EIA)进行生物测试 .结果表明 EIA和EROD这 2种生物试验方法均具有较好的准确性和很宽的线性范围 .比较 Micro- EROD分析结果与化学分析结果以及 EIA分析结果与化学分析结果 ,发现 Micro- EROD生物试验所测得的 TEQ值均高于化学分析法的 TEQ值 .其比值 1.83～ 3.06,平均比值 2.54± 0.59.而 EIA所测得的 TEQ值与化学结果的比率 0.5～1.4,平均比率为 0.83±0.40.显然由 EIA所测得的 TEQ的平均值比由 Micro- EROD所测得的结果更接近化学分析结果 .因此 EIA法更适合于对环境样品中二噁类化合物进行快速定量筛选 .     

简易、快速检测有机磷农药的酶片和生色基质片

研制出简易、快速检测有机磷农药的酶片和生色基质片。用胆碱酯酶抑制试验检测水中的有机磷农药,检测灵敏度在０．０１—１０ｍｇ／Ｌ范围,适宜温度在２５—３５℃之间,分析周期约为１５—２０ｍｉｎ。甲胺磷和水胺硫磷等硫代磷酸酯类农药经溴水活化后检测灵敏度也达上述水平。实际水样检测表明,检样中农药含量在检测灵敏度范围内时,阳性结果相当明显,溶液吸光度比值Ａ对照／Ａ检样＞２。由于检测时无需配制试剂和使用仪器,本法特别适宜于现场检测。     

时间分辨荧光免疫一步法检测微囊藻毒素的研究

利用稀土元素Eu³⁺ 标记微囊藻毒素偶联物MCLR-BSA,在固相包被二抗的微孔板上建立了微囊藻毒素的直接竞争时间分辨荧光免疫法.条件优化后Eu³⁺ 标记物的稀释度为1∶50,微囊藻毒素单抗的合适浓度为100 ng/mL.该法对微囊藻毒素检测的灵敏度为0.02 ng/mL,试剂的测量范围是0.05～10 ng/mL,回收率达到94％以上.     

应用生物酶法提取黄姜皂素的清洁工艺研究

文章采用生物复合酶法对薯蓣皂素进行提取研究,使黄姜淀粉和纤维素得到充分降解,促进葡萄糖与皂素的分离,从而有利于黄姜皂素的提取.通过正交实验进行试验确定复合酶处理黄姜皂素的工艺,即最适酶解条件为温度55℃,pH值4.0,时间6 h,每克黄姜酶用量为0.03 g,通过该条件进行试验发现,黄姜皂素收率提高26%.同时该工艺与...     

采用AF参数评价农药对地下水的污染

由农药在非饱和土壤中运移的一维弥散方程简化,得出衰减因子——AF参数模型．评价了应用范围广、用量大、毒性高的7种农药对地下水污染的潜能,顺序为：乐果〉甲胺磷〉甲草胺〉丁草胺〉敌敌畏〉甲基对硫磷〉对硫磷,“有可能污染”的深度分别为：乐果〉2m、甲胺磷2m、甲草胺1．5～2m、丁草胺1m、敌敌畏0．5m、对硫磷和甲基对硫磷不污染地下水。     

环境样品免疫检测基质效应分析与控制

免疫检测技术以其特异性强、灵敏度高、分析容量大、反应速度快、检测费用低廉等优点,逐渐成为环境样品大规模快速筛查和预警监测的首选技术.由于免疫检测无需样品预处理、能实现对样品的在线检测,因此环境样品中复杂的基质可能对免疫检测产生非常大的干扰和影响.以水环境中微囊藻毒素-LR的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测为基础,系统地考察了环境样品中各种背景基质对ELISA检测的影响,评价了各个基质的影响规律和程度,并研究提出了相应的控制和消除各不利影响的方法,最后统一提出水环境样品免疫检测抗基质效应干扰的控制方案,即采用10×PBS＋1%BSA＋0.5%EDTA作为免疫检测反应的缓冲体系,能有效消除各基质效应对免疫检测的干扰.该方案同样适应于其它不需要对环境样品进行预处理的免疫检测技术.     

蔬菜中有机磷农药残留的生物传感器法检测

将乙酰胆碱酯酶(AChE)固定在醋酸纤维膜上,将该膜组装在一支pH玻璃电极敏感膜表面,制成用于测定有机磷农药的电位型生物传感器,优化其制备方法。当溶液中存在有机磷农药,酶的活性受到抑制,酶活性的降低引起pH玻璃电极电位的改变,其改变程度与溶液中农药的浓度大小有关。用本文方法测定了蔬菜中的对硫磷、辛硫磷、氧乐果、敌敌畏,结果满意。     

土壤和沉积物中17种有机氯农药残留量的测定

利用混合溶剂超声萃取出土壤、沉积物中的有机氯农药,弗罗里硅土小柱净化去除样品中色素、脂肪等杂质,浓缩后采用DB-35ms毛细柱分离,气相色谱微池电子捕获检测器(μECD)分析17种有机氯农药的残留量。该方法净化效果好,色谱峰分离好,灵敏度高,17种有机氯农药检测限均低于0.07μg/kg,加标回收率为74%～110%,相对标准偏差为2.6%～8.4%。     

气相色谱法测定蔬菜中多种有机磷农药

探讨同时测定蔬菜中多种有机磷农药残留量的方法.蔬菜样品经前处理后用气相色谱仪测定甲胺磷、敌敌畏、乙酸甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、乐果、马拉硫磷和对硫磷等8 种有机磷农药残留量,测定了方法的回收率和精密度,分析了干扰情况.上述8 种农药的平均回收率分别为99.0%,96.0%,130.4%,101.3%,95.9%,99.4%,92.4%,91.0%,变异系数分别为6.91%,6.09%,9.23%,9.63%,9.18%,7.01%,6.82%,7.50%.该方法操作简便,回收率和精密度较好,干扰少.