红江橙器官发生及其影响因素

以红江橙（CitrussinensisOsbeckcv.‘Hongjiang’）实生苗的根尖、下胚轴、子叶、上胚轴、茎段及叶片为材料进行培养,结果表明：上胚轴、茎段出芽率较高,分别为978％（45／46）及70．7％（29／41）.ρ（MT＋BA）1mg·L-1对上胚轴出芽效果较好,ρ（BA）升高,出芽率随之下降红江橙愈伤组织的诱导,其适宜的培养基为MT＋2,4-D05＋BA（KT）1（ρ／mg·L-1）NAA与BA（或ZT）结合有利于红江橙愈伤组织的分化,低浓度的BA效果较好些,随BA浓度升高,分化率下降红江橙不同外植体诱导的愈伤组织,分化能力也有差异,子叶愈伤组织更易分化,分化率可达357％（15／42）;胚诱导的愈伤组织次之,其分化能力随着分化前培养时间的延长而下降无根苗诱导生根,其适宜的培养基ρ（MT＋NAA）1mg·L-1．     

根癌农杆菌介导的高赖氨酸蛋白基因转化叶用莴苣的研究

构建了植物表达载体pLBI，该载体携带35S启动子、高赖氨酸蛋白基因(LRP)、NPTⅡ基因和NOS终止子，对影响根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens L.)转化的多种因素进行探索后，建立了一种农杆菌介导的稳定的叶用莴苣遗传转化系统．选择目前生产上大量推广应用的叶用莴苣品种，以其无菌苗子叶为外植体，经农杆菌LBA4404(含质粒pLBI)感染，在含ρ(Kan)／mgL^-1=100的芽分化培养基上筛选转化芽，转入含相同浓度抗生素的生根培养基上进行生根筛选，直至得到完整的再生植株．PCR扩增及Southern blot的检测结果均表明，高赖氨酸蛋白基因已整合到叶用莴苣基因组中．图4表4参6     

青蒿试管苗开花及用花器官为外植体诱导丛生芽生产青蒿素

将培养于MS培养基上5wk的青蒿试管苗置于光周期13,光强6000lx,温度为26℃（昼）和22℃（夜）的条件下,成功地诱导其开花,利用不同发育阶段的花蕾和花器官为外植体诱导丛生芽,发现不同浓度（ρ）的6－BA对丛生芽的诱导率和青蒿素的生物合成有重要影响。结果表明：以花蕾为外植体诱导丛生芽的最佳培养基是：MS附加4.0mg L^-1的6－BA和0.05mg L^-1的NAA;但当ρ（6－BA）在0－0.5mg L^-1之间时,有利于青蒿素的合成ρ（6－BA）=0.5-4mg L^-1时抑制青蒿素的生命合成,丛生芽中促进青蒿素合成的最佳ρ（6－BA）为0.5mg L^-1,用HPLC法测定发现用此法得到的丛生芽青蒿素的含量比直接利用叶片诱导的丛生芽青蒿素含量高1倍。     

发根农杆菌转化海边香豌豆及转化体的体细胞胚胎发生

将海边香豌豆无功苗的子叶和下胚轴切段在附加ρ（2,4-D)=1mgL^-1,ρ（6BA)=0.5mgL^-1的MS培养基上预培养3d，然后与发根农杆菌A4菌液共培养30min。洗涤之后，在附加羧苄青霉素的无激素的MS培养基上培养。7－10d后，外植体切面处长出许多毛状根。继代培养时生长旺盛，且产生许多侧根和分枝。志状根的诱导频率与无菌苗培养天数和外植体来源部位有关。子叶切块的诱导率明显高于下胚轴，16d龄无菌苗的子叶切块诱导毛状根的频率最高。乙酰丁香酮处理菌液可以有效提高子叶外植体的毛状根诱导频率。将毛状根切段培养在含有ρ（2，4－D）＝1.0mgL^-1的MS培养基上可诱导出愈伤组织。该种愈伤组织转移到含有ρ（2，4－D）＝0.3mgL^-1的MS培养基上培养时，诱导出了许多早期体细胞胚。检测的转化组织均含有农杆碱和甘露醇。图2表1参19     

槐树组织培养中超度含水态苗发生与防止的研究

对槐树（Sophorajaponica）花药愈伤组织在培养条件下形成超度含水态苗的条件研究表明：短期培养的愈伤组织及在含有较低ρ（BA）的培养基上多形成正常苗,而经长期培养的愈伤组织及在含有较高ρ（BA）的培养基上产生了大量的超度含水态苗;在MS附加ρ（IAA）0．2mg／L、ρ（BA）5．0mg／L的培养基上,愈伤组织经连续1．5a以上的继代培养后,其表面产生的芽均为超度含水态芽;将这种愈伤组织和超度含水态芽转人含不同浓度和种类植物激素及生长调节剂的培养基后发现：BA和高ρ（KT）明显促进了超度含水态苗的形成;而一定ρ（NAA）和ρ（2,4-D）则显著地促进了正常苗的形成．对培养过程的观察显示：在各种培养基上形成的正常菌中,有一部分是由超度含水态的芽和苗转化而来,即由其顶端或腋生分生组织进一步发育转化而来,而另一些则由愈伤组织上重新产生．     

四川大叶黄精组培快繁技术

黄精市场需求量不断增加,较低的自然繁殖速度难以满足人们的需求.通过组织培养技术,建立黄精快速繁殖技术体系,可以高效获得大量优质种苗在生产上应用.首次以四川主载品种大叶黄精地下根茎芽为外植体进行组培快繁体系的初步研究.结果显示:外植体消毒先用0.5 g/L的多菌灵溶液预处理12 h,再用0.2%HgCl_2灭菌6 min+6min,污染率可得到有效控制;四川大叶黄精根茎芽最适宜的初代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L,萌发率达35%,长势健壮;不定芽分化培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,平均不定芽诱导个数为4.33个;壮苗培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+GA3 0.5 mg/L;生根培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC 0.2 g/L,生根率达89%.本研究表明以大叶黄精的地下根茎芽为外植体可快速获得大量组培苗,其中细胞分裂素6-BA在大叶黄精生长过程中起着重要作用,结果可为四川提供便捷优质大叶黄精供苗途径.(表5参26附图4)     

唐菖蒲原球茎培养的研究

以唐菖蒲球茎芽切段为外植体在含有2，4-D的脱分化培养基上诱导的愈伤组织，可分化出具有双极性的原球茎．通过继代培养，选择了合适的培养条件：激素配比ρ（2，4-D）＋ρ（NAA）＝1mm／L＋0．5mg／L，ρ（Sugar）＝30g／L．pH5．8，θ＝21～26℃．光照液体浅层培养．在优化的条件下，利用双层板径向流生物反应器进行唐菖蒲原球茎培养，28d生物量增殖8倍，原球茎数增殖9倍．     

转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)抗虫甜椒植株的获得

以12－14d苗龄的甜椒带柄子叶为外植体，经根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导，将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（sck）导入甜椒杂交种“中椒5号”和常规种“茄门”中，在对甜椒转化系统和芽丛诱导茎伸长的条件进行优化研究后，获得了卡那霉素抗性植株，最高转化率为16．7％，卡那霉素抗性筛选、PCR检测和Southern blot杂交均证实，nptⅡ基因和sck基因整合进甜椒基因组中，室内离体叶片饲虫和田间自然抗虫性鉴定进一步证明，转基因植株对铃虫（Heliothis armigera Hubner）具有一定抗性。     

麻疯树成熟胚乳再生植株及其气孔分析

对麻疯树成熟胚乳进行组织培养获得胚乳再生植株,并对其气孔进行分析.麻疯树成熟胚乳在25℃、12 h光照条件下培养7 d愈伤组织诱导完成,2,4-D浓度为2.0 mg L-1的MS培养基愈伤诱导效果最好,诱导率达89.29%.愈伤组织在含BAP的改良培养基上培养至黄绿色后转入分化培养基,在含IAA 0.25 mg L-1和ZT 1.5 mg L-1的WPM培养基上不定芽分化率达32.50%.将分化的不定芽从愈伤组织上剥离后转入含IBA、BAP和GA3的培养基上进行芽伸长培养.取胚乳不定芽叶片接种在含IBA 0.1 mg L-1、BAP 0.5 mg L-1和TDZ 0.5 mg L-1的MS培养基上诱导生芽后,再转入含IAA 0.25mgL-1、KT 0.5mg L-1、BAP 1.0 mg L-1和GA3 0.25 mg L-1的培养基上进行丛生芽的诱导,成芽率为85.2%.这些芽在含0.1 mgL-1 IBA的1/2 MS培养基上生根,大约有37.5%的芽生了根,平均有5.2条根系形成.与母本植株相比,再生的胚乳植株保卫细胞更大,且气孔密度减小.图2表6参24     

黄姜组培快繁技术试验研究

分别以黄姜茎段、叶片、块根为外植体,进行无菌系建立、芽分化、生根等试验,探讨黄姜组培快繁技术.结果表明:(1)茎段在①MS BA1.0 mg.L-1 NAA0.2 mg.L-1(单位下同);③MS BA2.0 NAA0.2;⑤B5 BA1.0 NAA0.2;⑦B5 BA2.0 NAA0.2四个培养基上培养,均能诱导出愈伤组织,但尤以⑦号培养基长势最佳;而在这四个培养基上接种的叶片因为全被污染,无愈伤组织形成.(2)块根在②MS BA1.0 NAA0.5;④MS BA2.0 NAA0.5;⑥B5 BA1.0 NAA0.5;⑧B5 BA2.0 NAA0.5四个培养基上均不能诱导成愈伤组织.(3)愈伤组织在①~⑧号共八个培养基上均能分化出芽,但分化率不一,以③号最高(达100%),④号最低(25.0%).(4)当丛生芽长至高约3~4 cm时,转接到以MS或1/2MS为基本培养基、附加有不同浓度NAA和IBA的培养基中,进行生根培养.生长素NAA与IBA配合均能诱导生根,NAA的浓度增高对根的诱导有抑制作用,而且使苗的生长受阻,出现叶片卷曲现象,用1/2MS与用MS相比,用1/2MS生根更粗壮.(5)将经过炼苗的生根试管苗移栽到混有河沙和砻糠灰(体积比为1:2)的复合基质中,移栽后35 d成活率达到87%以上.     

Residues and dissipation of the pesticide emamectin benzoate under Egyptian field condition: a case study

A simple, rapid analytical procedure for the quantification of emamectin benzoate in tomato was developed using high performance liquid chromatography with fluorescence detector (HPLC-FLD). Emamectin benzoate residues were extracted from tomato samples with n-hexane:ethyl acetate (1:1, v/v). The method involved derivatization using trifluoroacetic anhydride and 1-methylimidazole, prior to analysis by HPLC-FLD. Limit of quantification of this method was found to be 0.01 mg/kg, while limit of detection was 0.005 mg/kg. The dissipation of emamectin benzoate on tomato was studied, and half-life (t_1/2) was estimated in a field study carried out at three different locations. Emamectin benzoate was sprayed on tomato at recommended dosage. Samples of tomato were collected at 0, 1, 3, 7, 10, and 15 days after treatment. The t_1/2 of emamectin benzoate when applied at the recommended doses in tomato was approximately 2.5 days. The residue of emamectin benzoate reached below the maximal residue limit (MRL) 10 days after spraying at the tested dosage. Hence, a safe pre-harvest interval of 10 days is suggested before harvesting of tomato. This study would also be helpful for the Egypt government to establish the MRL of emamectin benzoate in tomatoes and provide guidance on the proper and safe use of this insecticide.     

番茄对污染土壤中邻苯二甲酸酯的吸收累积特征

利用盆栽实验研究了番茄对污染土壤中邻苯二甲酸酯(PAEs)的吸收积累特征。结果表明,番茄根系、茎、叶和果实均可以吸收累积PAEs化合物,其含量与土壤污染程度成正相关;相同处理的番茄茎、叶和果实中邻苯二甲酸正丁酯(DBP)含量均高于邻苯二甲酸异辛酯(DEHP),而番茄根系中DBP的含量低于DEHP; 4个不同处理方式土壤中DBP和DEHP的残留量顺序均为:灭菌土壤组灭菌土壤种植番茄苗组未灭菌土壤组未灭菌土壤种植番茄苗组。无论是灭菌处理还是未灭菌处理,有番茄苗组土壤中PAEs含量均低于无番茄苗组,未灭菌土壤种植番茄苗组土壤中PAEs残留量最低,PAEs削减率高达96.39%,有番茄苗组微生物数量大于无番茄苗组。这些说明土壤中PAEs的削减是番茄植物和微生物协同作用的结果。     

Prevalence of plasmid mediated pesticide resistant bacterial assemblages in crop fields

Three crop fields namely paddy sugarcane and tomato exposed to bavistin [Methyl (1H-benzimidazol-2-yl) carbomate], monocrotophos[Dimethyl(E)-1-methyl-2-(methyl-carbamoyl) vinyl phosphate] and kinado plus [(EZ)-2-chloro-3-dimethoxyphosphinoyloxy-X1, X1-diethylbut-2-enamide], respectively were chosen for the present investigation to know the bacterial population and degradation of pesticides. The chemical nature of the soil and water samples from the pesticide contaminated fields was analysed along with counting of the total heterotrophic bacteria (THB), Staphylococci and Enterococcci population. Mean calcium, phosphate and biological oxygen demand were maximum in tomato field water Field water recorded maximum phophate and silicate content, whereas, sugarcane field water elicited maximum dissolved oxygen content. On the other hand, available phosphate and exchangeable potassium were maximum is sugarcane field soil. Significant variations in the bacterial population were evident between the treatments in sugarcane field soil and tomato field water exposed to monocrotophos and kinado plus, respectively In addition, significant variations between THB, Staphlyococci and Enterococci population were also evinced in both the sugarcane andtomato fields. The dominant pesticide resistant bacteria, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis and Pseudomonas aeuroginosa harboured plasmids and the resistant trait observed were found to be plasmid borne.     

多效唑在番茄和土壤中的残留与降解动态研究

研究了多效唑（paclobutrazol）在番茄（Lycopersicon eseulentum）和土壤中的残留分析方法及残留动态。建立番茄和土壤样品中多效唑残留的固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）检测方法,样品用乙腈提取,再用φ（甲醇-二氯甲烷）=5∶95混合溶剂经LC-NH2固相萃取柱净化,以φ（乙腈-水）=55∶45作流动相,Shiseido C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）于222 nm波长检测,外标法定量。在0.1~5.0 mg·L-1范围内,多效唑峰面积与其质量浓度之间呈良好线性关系,相关系数为0.9995。采用田间试验方法,在番茄幼苗期施用不同多效唑质量分数50、100、200、600 mg·kg-1,研究在不同处理时间1、6 h,1、2、3、7、14、21、30、45、60 d,多效唑在番茄以及土壤中的残留动态变化。添加质量分数水平为0.05、0.1、0.5 mg·kg-1时,多效唑在果实、植株和土壤中的添加回收率分别为92.45%~103.70%、94.52%~98.85%和94.30%~102.10%,变异系数分别为3.69%~5.00%、1.58%~4.53%和1.28%~3.35%。结果表明：多效唑在番茄植株和土壤中的降解规律均符合一级动力学方程C=Coe-kt。当施用质量分数为600 mg·kg-1时,其在番茄植株中的残留半衰期为1.66 d,在土壤中的半衰期为2.78 d;在植株中的降解速率大于在土壤中的降解速率。按照推荐使用的施用浓度,采收时多效唑在番茄和土壤中无残留,证明推荐施用浓度是合理的。     

酸胁迫条件下对番茄生长、产量和品质的影响

通过盆栽试验研究了酸胁迫对番茄的生长、产量和品质影响.结果表明:在一定的酸胁迫强度下,番茄生长期明显延长;除5号处理(pH<3.5时)番茄的生长发育受到严重的抑制外,其余各处理植株的株高、茎叶干重和根长均高于对照植株;随着酸胁迫强度的加强,各处理植株的产量、成熟果率和维生素C含量随之下降,但番茄的可溶性糖量却增加;果实的总酸度与酸胁迫强度关系不大.     

TS—303对未成熟油菜种子的子叶细胞中BL分布的影响

用胶体金免疫定位技术对未成熟油菜种子的子叶细胞中BL的定位研究结果表明，金颗粒除主要分布在细胞核外，细胞质中也有少量金颗粒标记，但液泡和细胞壁中没有观察到金颗粒存在外施TS-303可明显导致未成熟种子的子叶细胞核中金颗粒标记密度的大量增加，说明TS-303很可能只影响幼嫩组织的细胞核．     

保护地番茄养分利用及土壤氮素淋失

在施用不同复合肥料的条件下,对保护地蔬菜蕃茄对N、P、K养分的吸收利用及保护地条件下土壤的硝酸盐淋洗进行了研究,结果表明,复合肥的品种及施肥水平对番茄的产量影响不大,与CK相比番茄果实增产12．．7％－18．4％;复合肥N、P养分的当季利用率不足10％,而K素的当季利用率也不超出25％,传统的大水漫灌条件,蔬菜保护地土壤硝酸盐的淋洗状态相当严重,并有可能造成地下水的硝酸盐污染,长期过量施肥及大小漫灌等措施是造成土壤养分累积、硝酸盐淋洗严重、肥料利用率低的根本原因,图2表3参11     

Persistence and dissipation of dazomet in soil and tomato (lycopersicon esculentum mill) seedlings

The persistence and dissipation pattern of dazomet residues in nursery bed soil and tomato seedlings under field condition and in submerged soil and surface water under laboratory condition was studied. In nursery bed soil the half life (t _1/2) of dazomet ranged from 1.85 to 3.09 days indicating very rapid dissipation. No residues existed in tomato seedlings sown on the treated plots 3 weeks after application and the seedlings were healthy and devoid of any deformation. Under submerged condition dissipation was much faster both in soil and surface water, t_1/2 being 0.82–0.84 days only in water.     

西红柿镍毒害的土壤主控因子和预测模型研究

选取我国有代表性的17种土壤,运用生态毒理学方法研究了土壤中外源镍(Ni)对西红柿的毒性,结果发现土壤中外源Ni对西红柿的生长毒性主要受土壤pH值、有机碳含量的影响.在供试淋洗(使用模拟的人工雨水滤洗定量的土壤样品)和非淋洗土壤中,Ni对西红柿生物量50%抑制的毒性阈值(EC50)范围分别从11mg·kg-1到932mg·kg-1和从7mg·kg-1到2055mg·kg-1,其最大值和最小值比例分别达到了85和294倍.土壤pH值是土壤中Ni对西红柿生长毒性的主控因子,进一步引入土壤有机碳因子时,淋洗和非淋洗土壤理化性质和EC50之间回归方程的决定系数R2由0.853和0.743分别提高到了0.925和0.824.利用土壤性状(土壤pH值、有机碳含量)可以较好地预测土壤中外源Ni对西红柿生长的毒性阈值.     

番茄HP1和HP2基因RNA共干涉载体的构建及遗传转化

番茄HP1和HP2是色素积累的负调控因子,在光形态建成和色素积累调控中起着重要作用.将番茄HP1、HP2基因片段导入到植物表达载体pBI121,用番茄果实特异表达的TMF7基因的启动子替换原有的CaMV 35S启动子,构建果实特异表达HP1、HP2双基因RNA共干涉植物表达载体pBI121-TMF7-HP1HP2.通过根癌农杆菌介导转入番茄子叶,经组织培养成功获得转基因植株.半定量RT-PCR分析显示,转基因植株果实内HP1、HP2的表达量均明显低于野生型植株果实.转基因植株果实叶绿素含量比野生型明显升高,而叶片中的叶绿素含量无明显差异.该研究结果为采用基因工程的方法改善番茄果实营养品质作出了新的尝试和提出了新的思路.图6表2参15