超滤分离,浓缩,脱盐青霉素酰化酶的研究

本文用中空纤维超滤膜对青霉素酰化酶进行了分离，浓缩的研究，实验了不同种类的膜，不同的酶活浓度，不同运行时间和不同压力等因素对膜透水量，截留率和酶的回收率的影响。结果表明：采用超滤技术分离，浓缩，脱盐青霉素酰化酶工艺，具有操作简单，酶的比活高。回收经高和省能等特点，适用于工业化生产。     

米曲霉产氨基酰化酶条件及部分酶学性质研究

通过单因子和多因子摇瓶正交优化试验,确定了米曲霉液态发酵产氨基酰化酶的最佳发酵条件.优化发酵培养基组成(ρ/gL-1):葡萄糖40,蔗糖10,可溶性淀粉20,蛋白胨2.5,马铃薯液1000mL,pH自然.培养基装量50mL/250mL三角瓶,接种量4%.培养温度30℃,转速100r/min,发酵时间42h.每50mL培养物的总酶活由优化前的2627u提高到7338u,是优化前的2.79倍.研究了米曲霉氨基酰化酶的部分酶学性质.该酶催化反应的最适pH为7.0,最适温度为40℃,低浓度的Co2 (5×10-4mol/L)对酶活激活作用显著.图5表2参8     

膜接触器从混合气中脱氨性能的研究

采用中空纤维膜接触器进行了从模拟“铜洗再生气”中脱氨的研究,探讨了影响脱除效率的主要因素．试验表明:膜吸收法对混合气中的氨有很好的脱除效果,当混合气中氨的浓度为２０．０ｇ·Ｎｍ－３,膜组件的处理能力为５．１Ｎｎ３·ｍ－２·ｈ－１时,脱氨率大于９９．９%,即脱氨后氨的浓度低于０．０２ｇ·Ｎｍ－３．当组件内吸收液供应充足时,分离过程的传质阻力主要在膜和气体一侧．研究发现,当用挥发性水溶液(盐酸)作为吸收剂时,由于ＮＨ４Ｃｌ晶体的桥联作用导致疏水性微孔膜亲水化．     

自剪切及活性相关位点的组合突变提高头孢菌素C酰化酶水解活力

7-氨基头孢烷酸是合成头孢类抗生素的重要中间体,利用头孢菌素C酰化酶直接催化头孢菌素C获得7-氨基头孢烷酸的一步酶法与其它方法相比更加经济和环保,其关键是获得高活性的头孢菌素C酰化酶.本文以来源于Pseudomonas sp.KAC-1的Ⅰ类头孢菌素C酰化酶(CPCase-kac)蛋白序列为模版,对其基因进行全局优化设计,人工合成目的基因,并克隆至表达载体p ET28b,实现了CPCase-kac的高效表达.但是重组蛋白CPCase-kac表达活性较低,且自剪切不彻底,表达蛋白中存在前体形式的CPCase-kac,而头孢菌素C酰化酶的自剪切和活性往往相关.对CPCase-kac分子中影响活性的Y150、Q220、F347氨基酸位点进行饱和突变发现,活力提高的突变体Q220W、Q220G其第二次自剪切明显降低,而活力提高的突变体Y150R、Y150N、Y150H、Y150W及F347H、F347Y,自剪切却没有显著影响.将这些突变进行组合,最终得到了比活力提高了8.3倍的突变体Y150W/Q220G/F347Y.虽然Y150W/Q220G/F347Y突变体活性显著提高,但是其也具有Q220G较差的第二次剪切的特性.同时发现,外部条件改变可以影响CPCase前体或α’亚基的继续自剪切.这些发现为进一步提高CPCase-kac活性及应用打下了基础.     

一种嗜热细菌来源角质酶的分离纯化及酶学性质

通过跟踪发酵液中pNPB水解酶活性,对角质诱导的Thermobifida fusca 口发酵液进行分离纯化.采用活性炭脱色、硫铵沉淀、Phenyl HP疏水色谱、DEAE sephamse阴离子交换色谱等方法,分离纯化得到电泳纯PNPB水解酶.该酶水解角质可得到角质单体,是一种角质酶.SDS-PAGE电泳结果显示,角质酶表观分子量约为29×10~3.该酶的最适温度为60℃.在40℃和60℃下均具有良好的热稳定性.最适pH为8.0,pH稳定范围为6.0～9.0.该角质酶的生化性质适合在纺织工业中应用.图8表2参17     

产碱杆菌DN25中降氰酶的分离纯化及生化特性

以一株可降氰的产碱杆菌DN25为酶来源,通过超滤、30 mg/mL硫酸鱼精蛋白沉淀、30%～70%硫酸铵盐析和Phenyl-Toyopearl 650M疏水层析等步骤,获得比活力为44 U/mg的纯化酶制剂.在确定酶浓度、反应时间等氰降解活力测定条件后开展酶学性质研究,试图为将来氰降解代谢机理的深入研究和菌株的基因工程改造提供理论基础.研究结果表明,此纯化酶催化氰化物水解的最适pH值为8.0,最适温度为30℃.该酶在pH 7.0～8.0区域稳定,而在pH>9时会很快失活;在30℃保存10 h,酶活力保持稳定,高于60℃,酶快速失活.加入甘氨酸稳定剂,在60℃下保存20 min酶活仍可保留19.6%.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.11 mmol/L,最大反应速率Vmax为0.23 mmolL-1min-1.     

乳状液膜法迁移及分离铬(Ⅵ)的研究

本文采用以叔胺N7301为流动载体、兰113A为表面活性剂、煤油为膜溶剂、NaOH作内相试剂的乳状液膜体系迁移分离铬(Ⅵ).研究了其迁移机理,确定了适宜制乳、迁移分离及破乳等有关条件,实验表明,不同浓度的含铬(Ⅵ)水样经液膜处理后,其含铬(Ⅵ)量均降至0.5μg·ml~(-1)以下,低于国家排放标准.     

一株产木聚糖酶嗜热真菌樟绒枝霉的鉴定及其产纤维质降解酶系分析

对分离得到的一株产耐热木聚糖酶的真菌CAU521进行鉴定,并对其产纤维质降解酶系进行研究.通过菌落形态、显微镜产孢结构以及18S rDNA序列同源性比对等分析,鉴定该菌为樟绒枝霉(Malbranchea cinnamomea),其最适生长温度为45℃,为一株嗜热真菌.该菌能以农业废弃物玉米芯为碳源液体发酵产耐热木聚糖酶,50℃下培养7 d,木聚糖酶的最高酶活力达到173 U/mL.SDS-PAGE和酶谱分析表明该菌株能同时分泌多种纤维质降解酶:4种木聚糖酶、2种纤维素酶、3种葡聚糖酶和1种甘露聚糖酶.结果表明樟绒枝霉CAU521在降解和利用纤维质材料方面具有潜在的应用价值.     

转化血型用蕃茄α－D－半乳糖苷酶的分离、纯化及理化性质

成熟蕃茄匀浆后，经硫酸铵盐析，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０离子交换层析，ＳｅｐａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ－Ａｇａｒｏｓｅ亲和层析，获得了α－Ｄ－半乳糖苷酶（Ｃ．Ｅ．３．２．１．１１）。酶制剂经ＰＡＧＥ检测为一条带；ＳＤＳ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得酶Ｍｒ为３４０００；比活力５２．９Ｕ／ｍｇ·；提纯倍数为５２９０１产率为４５％．酶专－催化以α－Ｄ－半乳糖为末端ａ－（１，３）连接的糖苷键，以ＰＮＰＧ（对硝基苯－α－Ｄ－半乳糖昔）为废物，酶催化反应的Ｋｍ＝０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为６７μｍｏｌ·ｍｇ１－·ｍｉｎ－１．ｔ稳定范是０～３５℃；ＰＨ稳定范围是４．０～７．０．最适ｐＨ为５．１．半乳糖是酶的竞争性抑制剂；Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｇ＋和ＥＤＴＡ对酶活性无影响．纯酶制剂可作为Ｂ型血向Ｏ型血转化的工具酶液．     

黑曲霉Aspergillsu niger SL2-111所产酸性蛋白酶的分离纯化及酶学特性

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25柱脱盐、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S-200分子筛层析和高效液相色谱等方法,从黑曲霉菌株Aspergillus niger SL2-111的发酵曲中提取了一种酸性蛋白酶,经SDS-PAGE验证,该酶纯化水平已达到电泳纯.该酶的表观分子量(Mr)约为47×103,最适pH值为3.0,pH稳定性范围为2.5～6.0,最适温度为50℃,温度稳定性范围为30～60℃;Gu2+、Mn2+对其有激活作用,Hg2+、Ag+对其则有轻度的抑制作用;该酶的氨基酸组成为:中极性酸性氨基酸占17.29%,极性碱性氨基酸占4.50%,极性中性氨基酸占38.50%,其它为非极性氨基酸;N端氨基酸序列为SKGSAVTTPQ,经序列同源性比对,表明该酶与其它曲霉酸性蛋白酶具有极高的同源性.图4表5参15     

液膜法处理硫普罗宁废水的研究

采用W／O型乳状液膜法提取水溶液中的硫普罗宁,考察了载体、温度、硫普罗宁浓度以及油内比、试剂比、乳水比对提取率的影响,并得出了液膜法提取硫普罗宁的最佳乳液配方：油内比＝1：1,乳水比＝1：2,试剂比＝6－8,载体浓度＝5％,温度20℃,转速＝240－250r.min^-1,其提取率高达90％。     

丙烯腈共聚物超滤膜的研究

本文以丙烯腈，乙酸乙烯酯，乙烯基吡啶等三元共聚物为材料，研究了制备平板超滤膜各主要参数对成膜性能的影响并初步纺制了中空纤维膜。     

超滤膜污染和清洗方法的研究

本文以牛血清蛋白为料液,用酸、碱和表面活性剂作为清洗剂,对聚砜、聚丙烯腈等四种不同材质的超滤膜进行了污染和清洗实验,同时还研究了不同ＰＨ值对膜清洗效果的影响,结果表明,对于季铵化聚砚膜,用ＮａＯＨ清洗效果较好,丙烯腈膜以ＨＣｌ清洗效果为好;Ｐ天等电点附近,容易引起吸附     

聚丙烯中空纤维膜结构与氨水分离性能的研究

本文研究了聚丙烯中空纤维膜成型的工艺条件与结构性能的关系，并利用聚丙烯中空纤维膜组件进行了氨／水分离和影响分离效果的各种因素的研究。结果表明：在制膜工艺中，聚丙烯分子链在应力场下的结晶过程对后续的轴向拉伸形成微孔结构是非常重要的；伸长率为１６０％时的聚丙烯中空纤维膜，具有最大的孔隙率、平均孔径和透气率；其组件在氨／水分离中具有较好的分离效果，脱氨率可达９９％以上。进一步对氨／水分离的研究表明：分离     

溶剂气浮分离法的基础研究

本文研究了待分离物呈表面活性物系（甲基橙－十六烷基氯化吡啶、十六烷基氯化吡啶）和呈疏水性物系（铜－二乙基二硫代氨基甲酸钠、镍－丁二酮肟）的溶液气浮变化规律。红外光谱分析表明，分离效率的高低与有机相和气浮分离物相互作用的强弱不相关。通过高速摄影及计算证明，水相和有机相两相界面间的稳定的气泡层存在，它一方面使待分离物质在水相中的停留时间在大增加，另一方面又保护了已捕集的待分离物质，从而增加了气泡吸附总     

电感耦合等离子体-质谱法研究大气颗粒物中元素浓度

1　IntroductionAirborneparticulatematterisoneoftheimportantmarkersofairqualityandisanimportanthealthconcerninurbanareas,especiallywithrespecttoanumberofchronicrespiratorydiseases.Medicaldatasuggeststhatitisthisfractionofparticulatematterthatbecomesdeeplyi…     

超滤法回收PVA并回用于生产的扩大实验

本工作采黑由美国引进的超滤装置,在湖南湘潭纺织印染厂进行了从退浆废水中回收pVA的生产性扩大试验,探讨了料液温度、浓度,操作压力等因素对超滤性能的影响,并简单介绍了回收浆料回用于浆纱,织布及印染生产的情况。     

金属浓度,半透膜孔径,水温及配位体对半透膜囊吸收铜的影响

在实验室条件下，研究了影响树脂－半透膜囊吸收铜的主要因素，重点探讨了水相铜含量，半透膜孔径，温度以及天然河水中的有机配位体对吸收的影响。结果表明，半透膜囊吸收量与水相游离铜浓度，水温及半透膜孔径的非整数次幂成正比，其中包括ＥＤＴＡ，河水富里酸，以及河水中的各种天然有机物在内的配位体均与铜生成不能被半透膜囊吸收的络合物，研究结果进一步证实了半透膜囊对水环境中游离态微量金属进行长期监测的可行性。     

聚丙烯中空纤维膜萃取水溶液中铜离子的研究

研究了聚丙烯中空纤维膜萃取二(2-乙基己基)膦酸(D2EHPA)水溶液中铜离子的工艺条件.结果表明,两相流速、膜面积对萃取率基本无影响;而水溶液的pH值和有机相初始铜离子浓度的改变使萃取率在40%-99%之间变化.整个萃取过程的传质阻力主要来源于D2EHPA和 Cu2 的界面配位络合反应阻力,铜浓度比较高时,传质阻力与铜浓度无关;而当铜浓度降低时,传质阻力随着铜浓度的降低而增大.     

紫外光光催化降解杀虫剂哒螨酮降解产物的分布及应用研究

藉助GC-MS对乙腈／水体系中,360nm以上紫外光光催化杀虫剂哒螨酮产生的降解产物进行定性分析,共检测出15种中间产物,通过降解产物GC峰面积与时间的关系,半定量分析了其生成变化,得到典型的钟型曲线,基于以上分析提出了光催化降解哒螨酮的机理,另外,研究了不同pH值下,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)水溶液中哒螨酮的降解,结果表明,碱性条件下有利于光催化降解反应的进行。