利用唐鱼雌激素受体构建环境雌激素重组酵母测评系统的研究

利用唐鱼雌激素受体基因片段构建重组酵母,用以筛选环境雌激素类化学物质.实验先将唐鱼雌激素受体terα基因片段插入载体pGADT7中构建表达质粒p GADT7/TERα,同时将雌激素效应元件(ere)片段插入pMP206载体中构建报告质粒pMP206/ERE-Lac Z;然后把表达质粒和报告质粒共转化到酵母AH109中,经筛选成功构建了由唐鱼雌激素受体调控的表达lac Z基因的重组酵母AHpTERα/ERE.结果表明,所构建的重组酵母AHpTERα/ERE在不同浓度17β-雌二醇(E2)的诱导下,β-半乳糖苷酶的活性呈现出明显的剂量-效应关系,其EC50为(0.521±0.700)nmol·L-1.与DMSO对照组相比,重组酵母在17β-雌二醇诱导下有明显的β-半乳糖苷酶活性增强的现象.在不同浓度17α-乙炔基雌二醇(EE2)、壬基酚(NP)及其混合物、双酚A(BPA)、17β-雌二醇(E2)(阳性对照)的诱导下,重组酵母均呈现出剂量-效应关系,且灵敏度大小为E2EE2NPBPA.结果表明,本研究成功构建了重组基因酵母测评系统,初步判定该重组酵母可应用于环境雌激素的筛选.     

重组基因酵母法研究酞酸酯类化合物的类雌激素作用

为了检测五种酞酸酯类化合物的类雌激素活性,采用重组人雌激受体α、相关效应元件以及β-半乳糖苷酶报告基因酵母分别测定17β-雌二醇(E)2、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)单独作用时诱导酶活并计算其EC50。通过各化合物与E2的EC50的比以及最大β-半乳糖苷酶活性来比较酞酸酯类化合物的类雌激素活性。五种酞酸酯类化合物的实验浓度范围为1.0×10-3~1.0×10-11 mol/L。结果表明,DEP(1×10-7~1×10-9 mol/L)、DBP(1×10-6~1×10-9 mol/L)、BBP(1×10-3~1×10-6 mol/L)具有明显的类雌激素活性,诱导的最大酶活分别为:1.515、0.832 2、1.669,而DMP和DOP并未检出明显的类雌激素活性。DEP、DBP、BBP与E2的EC50的比分别为8.85×10-2、2.54×10-2、8.82×10-6。说明DEP、DBP在低浓度就表现出类雌激素活性,而BBP在较高浓度才表现出类雌激素活性。     

壬基酚对鲫鱼(Carassius auratus)的雌激素效应研究

实验研究了环境雌激素4-壬基酚(NP)对鲫鱼(Carassiusauratus)的剂量-效应关系。雄性鲫鱼腹腔注射不同剂量的17β-雌二醇(E2)(质量分数分别为0 01,0 10,1 00mg kg(注射剂量 鱼体重,下同))和4-壬基酚(NP)(质量分数分别为1,10,50,100,200mg kg),用ELISA方法测定鲫鱼血浆中卵黄蛋白原含量。结果显示,与对照相比,在注射后14d内,0 01mg kgE2处理组和1 00mg kgNP处理组鲫鱼血浆卵黄蛋白原含量没有显著差异;其他各处理组在注射后8d,血浆卵黄蛋白原含量显著升高(P<0 05),且与暴露浓度呈依赖关系;注射后14d,10,50,100和200mg kgNP处理组的含量依次是对照组的10,59,340和435倍。研究表明,NP对鲫鱼具有明显的雌激素效应。      

重金属镉胁迫对尼罗罗非鱼抗氧化酶系统的影响

为评估重金属镉（Cd2+）对鱼类抗氧化酶活性的影响,本文采用静水生物测试的方法,将尼罗罗非鱼暴露于不同浓度水平（0、0.5、1.5、3.0和6.0mg/L）的Cd2+溶液中,21d后测定尼罗罗非鱼肌肉、肝脏、肾脏、脾脏和鳃5种组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活性和谷胱甘肽（GSH）的含量。结果表明:重金属镉对尼罗罗非鱼抗氧化酶活性产生影响。尼罗罗非鱼肝脏组织的SOD、CAT活性和GSH含量显著高于其他4种组织,具有组织特异性。肝脏组织的SOD、CAT活性和GSH含量随着镉浓度的升高呈下降趋势,高浓度组（3.0mg/L）和极高浓度组（6.0mg/L）尼罗罗非鱼肝脏组织的SOD活性显著低于对照组（P<0.05）。肝脏组织中SOD、CAT活性和暴露水体中镉的浓度水平呈现明显的剂量-效应关系。与对照组相比,暴露组尼罗罗非鱼肾脏组织中SOD、CAT活性及GSH含量均处于诱导状态;对于鳃组织而言,SOD、CAT活性呈现低浓度（0.5mg/L）时被诱导,高浓度时被抑制。不同暴露组尼罗罗非鱼肌肉和脾脏组织中SOD、CAT活性与对照组没有显著性差异（P>0.05）。     

短期氮添加对黄山松林土壤碳组分的影响及其微生物机制

人类活动和大气沉降增加了陆地生态系统氮的输入,显著改变了生态系统碳循环.为了更好地理解氮沉降如何调节森林土壤有机碳组分动态,及其潜在的微生物机制.本研究在福建戴云山黄山松林设置3个氮添加梯度（对照（0 kg·hm^-2·a^-1）、低氮（40 kg·hm^-2·a^-1）、高氮（80 kg·hm^-2·a^-1） ）以模拟氮沉降.通过测定土壤基本理化性质、土壤微生物生物量、酶活性和碳利用效率,利用两步硫酸水解法将土壤有机碳分为量小、周转快的活性碳组分和量大、周转慢的惰性碳组分,以探究两年氮添加对亚热带黄山松土壤有机碳组分的影响.与对照相比,氮添加显著降低0~10 cm土壤活性碳组分含量,增加土壤惰性碳含量.氮添加提高了参与碳、氮和磷获取的3种水解酶活性（β-葡萄糖苷酶、β-N-乙酰氨基酸葡糖苷酶、酸性磷酸单酯酶）,并显著降低了土壤微生物碳利用效率.冗余分析和随机森林模型表明,土壤微生物碳利用效率、微生物生物量和β-葡萄糖苷酶是影响土壤碳组分变化的主要因子,且土壤微生物碳利用效率与活性碳呈显著正相关,与惰性碳呈显著负相关;微生物生物量碳与活性碳呈显著正相关,与惰性碳无显著关系.综上所述,土壤微生物生物量减少、碳利用效率的下降导致活性碳组分含量减少,而惰性碳组分含量增加,进而提高黄山松林土壤有机碳的稳定性.     

环境医学

起人肺泡上皮细胞DNA损伤,与阴性对照组相比,其拖尾率和尾长差异均有显著性(P<0 .05),且存在剂量一反应关系。结论:细颗粒物具有一定程度的遗传毒性。图1表3参16X182(X) 301981沈阳市大气悬浮颗粒物与心血管疾病死亡率/王慧文(沈阳医学院预防医学系)…//环境与健康杂志/天津市卫生防病中心一2(X)3,20(1)一13一巧 环图R一36 为了解大气总悬浮颗粒物C】SP)对心血管疾病的危害程度,采用生态学研究方法,运用Poisson回归分析沈阳市昭P与心血管疾病死亡率(11珍6一2仪刀年)的联系。结果表明,调整了时间、气象因素后,巧P每增加50解时,总人群心…     

不同粒径汽车尾气颗粒物对A549细胞毒性作用的比较

讨论并比较了不同粒径汽车尾气颗粒物对人肺癌上皮细胞A549的毒性作用.通过采样器MOUDI分级捕获不同粒径的汽车尾气颗粒物,再分别以0、50、100、200、400 μg·mL^-1的浓度及不同粒径的尾气颗粒物对A549细胞染毒48 h,然后用四甲基偶氮唑盐比色法 检测颗粒物对细胞活力的影响,用乳酸脱氢酶（LDH）释放法测定细胞膜完整性的改变,用超氧化物歧化酶（Super oxide dismutase,SOD）及丙二醛（Malondialdehyde,MDA）试剂盒测定细胞的氧化应激水平及氧化损伤.结果显示：染毒浓度为50 μg·mL^-1时,各粒径染毒组与对照组,以及各粒径染毒组之间细胞生存率的差异均不显著（p>0.05）;染毒浓度为100~400 μg·mL^-1时,与对照组相比,各粒径汽车尾气颗粒物均以剂量依赖的方式引起细胞存活率降低（p<0.05）;同一染毒浓度下,PM_0.18~1.00组抑制细胞增殖的能力、破坏细胞膜完整性的能力及引起胞内氧化应激水平升高的能力均显著强于PM_1.00~3.20组,其中,PM_0.56~1.00组毒性最大.与对照组相比,各粒径染毒组胞内MDA含量均上升（p<0.05）,其中,PM_0.56~1.00组胞内MDA含量最高,其他粒径染毒组彼此之间的MDA含量差异不显著（p>0.05）.因此,汽车尾气颗粒物可抑制A549细胞增殖功能,破坏细胞膜的完整性,引起细胞氧化应激及膜脂质的过氧化损伤.不同粒径汽车尾气颗粒物对细胞的损伤作用有所差异,PM_0.18~1.00的毒性强于PM_1.00~3.20,而PM_0.56~1.00的毒性又强于PM_0.18~0.56.     

Assessment of estrogen disrupting potency in animal foodstuffs of China by combined biological and chemical analyses

Food has been documented as one of major routes for human exposure to environmental estrogens（EEs）, but information on the occurrence of EEs in animal foodstuffs is still scarce.This study analyzed estrogenic activity in 16 types of animal foodstuffs（n = 142） collected from four cities（Wuhan, Guangzhou, Wenzhou and Yantai） of China by combined yeast estrogen screen（YES） bioassay and chemical analysis. By bioassay, all samples＇ extracts were found to induce estrogenic activities and the bioassay-derived 17β-estradiol equivalent（EEQbio） ranged from 8.29 to 118.32 ng/g. In addition, the samples were analyzed by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for further chemical analysis. 17β-Estradiol was found in all samples in this survey at levels of 0.44 to 15.04 ng/g.All samples had 33.1% detection rate of 17α-ethinylestradiol（EE2）, and the maximum concentration was 2.80 ng/g. Bisphenol A and 4-nonylphenols were detected in 83.8% and83.1% of samples, with concentrations up to 12.56 ng/g and 35.76 ng/g, respectively.However, the concentrations of estrone, diethylstilbestrol and 4-t-octylphenol were found to be below the limit of detection. A comparison of EEQbiomeasured from the YES assay and EEQchemcalculated from chemical analysis showed good correlation（R2= 0.84）. Based on the results, the YES assay can be used as a rapid pre-screening method for monitoring the levels of estrogenic activity in large numbers of animal foodstuffs, and chemical analysis used in combination can be used for the identification of specific EEs.     

小鼠子宫增重法检测国产三氯杀螨醇的雌激素生物活性

为了解我国商品农药三氯杀螨醇是否具有明显的雌激素活性，利用整体给药方式检测了不同剂量三氯杀螨醇对未成熟小鼠子宫的作用。结果表明，较低剂量的三氯杀螨醇未使小鼠子明显增重，当剂量增加到４ｍｇ和８ｍｇ时，子宫重量明显增加，与对照组结果相比 ，有显著差异。     

重污染型河水中典型内分泌干扰物的臭氧氧化去除研究

研究了臭氧直接氧化黑臭河水对于常规污染物和典型内分泌干扰物的去除效果.从南方某条污染严重的黑臭河涌中采集原水,臭氧投加浓度分别为28 mg·L1和42 mg·L-1、对应曝气时间30 min和80 min,考察臭氧氧化对黑臭河水中化学需氧量(COD)、氨氮、色度和浊度,以及正壬基酚(4-n-NP)、叔辛基酚(4-t-O...     

ERα和ERβ介导的有机磷农药雌激素效应差异分析

雌激素受体（Estrogen Receptor,ER）ERα和ERβ能与雌激素特异性结合,它们在结构上的差异性可能影响与类雌激素的相互作用,这进而会影响其功能.因此,针对10种有机磷农药对ERα和ERβ的雌激素效应差异,采用分子对接方法比较分析了它们与ERα、ERβ相互作用的差异并筛选出与ERα和ERβ相互作用的最佳结合模式.结果发现,10种有机磷农药分子与ERα配体结合域（Ligand Binding Domain,LBD）精氨酸（Arg394）、赖氨酸（Lys449）、色氨酸（Trp393）形成氢键;而部分农药分子与ERβLBD精氨酸（Arg346）、亮氨酸（Leu343）、赖氨酸（Lys401）形成氢键.有机磷农药配体与ERαLBDArg394、Lys449、苯丙氨酸（Phe445）、脯氨酸（Pro324）、Leu387、谷氨酸（Glu353）、甘氨酸（Gly390）等存在疏水作用,与ERβLBD氨基酸Arg346、Glu305、Leu343、蛋氨酸（Met336）、组氨酸（His279）、丙氨酸（Ala302）等存在疏水作用.采用量子化学从头算进一步分析了10种有机磷农药分子表面静电势的差异.研究发现,有机磷农药分子与ERα和ERβ受体不同的相互作用是导致雌激素效应差异的重要原因.     

环境荷尔蒙概述

环境荷尔蒙对环境的污染以及对内分泌的干扰作用已经引起世界各国的广泛关注。叙述了环境荷尔蒙的概念、种类和危害，并且对环境荷尔蒙的监测分析方法进行评述。     

己烯雌酚降解菌固定化条件优化及其降解性能

以海藻酸钠为包埋剂,制备了己烯雌酚(DES)降解菌株S(Serratia sp.)的固定化菌剂,通过正交试验确定了菌株S的最佳固定化条件:海藻酸钠质量分数为4%,菌悬液与海藻酸钠重量比为1:2,CaCl₂质量分数为4%,交联时间为6h.菌株S的固定化菌剂比游离菌株更有优势;7d时,固定化菌株S对无机盐培养基中DES的去除率为83.84%,较游离菌株高22.84%.优化了固定化菌株S对溶液中DES的处理条件:固定化菌株S接入量为300g/L,初始底物浓度为20~40mg/L.固定化菌株S对DES浓度为40.01,37.90 ,33.52μg/L 3个排污口污水中DES的去除率分别达90.0%,96.0%,96.7%.利用固定化菌株处理实际污水中DES等雌激素具有应用潜力.     

烷基酚聚氧乙烯醚类物质的环境雌激素效应

随着环境污染的加剧,环境污染物的雌激素效应成为当前科学研究的一个热点,烷基酚聚氧乙烯醚（APEs）类物质即为具有雌激素效应的环境污染物之一、APEs为一类非离子表面活性剂在工业生产和家庭洗涤中应用广泛,APEs类物质进入环境后可以降解为一些中间代谢物,这些中间代谢物具有环境持久性,很难在环境中进一步降解．研究人员通过3种活体外生物评估法研究发现APEs的中间代谢物具有雌激素活性,可以诱导水体中雄性鱼类等生物的雌性化,同时对哺乳动物和人类健康也具有潜在危害,因此进行更加深入研究,确定APEs类物质对人体的危害,限制APEs的使用已成为当务之急     

AO与AAO工艺去除雌激素效能对比及分析

为探讨不同污水处理工艺对雌激素类有机物的处理效能,本研究设计并同时运行了AO和AAO两种污水处理工艺,在稳定运行条件下,比较了两种工艺对各种常规水质指标和雌激素的去除状况.试验结果表明,AAO系统对污染物去除效能明显优于AO系统.AAO对COD、TN、NH4+-N、TP及TOC的去除效能分别比AO高出7.55%、20....     

Differential response of multiple zebrafish hepatic F-box protein genes to 17α-ethinylestradiol treatment

Estrogens are accumulating in environment and their e ects on a variety of reproductive processes and tumorigenesis were reported by previous study, but the mechanism of estrogen promoting neoplasia was still not clear. F-box protein (FBP) is the component of E3 ubiquitin ligase which takes part in a variety of key biological processes. In this study, using mature male zebrafish, which are more sensitive to estrogen treatment, we examined influence of 17 -ethinylestradiol (EE2) exposure on the expression of a series of hepatic FBP genes, which take part in a variety of biological processes, including tumorigenesis. The influence of EE2 on the expression of hepatic mRNA concentrations of FBP genes were quantified based on the expression of the optimal internal control gene in male zebrafish after 7-day exposure to EE2, from a low-dose concentration (1 ng/L) to environmentally relevant concentrations (10, 100 ng/L). Our results showed that EE2 exposure reduced the expression of fbxl14a, fbxl14b, fbxo25 and -TRCP2b, but enchanced the expression of skp2. While the alterations in fbxl2, fbxw7, fbxo9, -TRCP2a, fbxl18 and fbxo45 mRNA levels were not observed after EE2 exposure. Thus, our results showed that the expression of hepatic FBP genes exhibited di erentially in male zebrafish exposed EE2. The changes of the expression level of FBP genes induced by EE2 may be an important clue to elucidate the correlations of estrogen and hepatic tumors.