鳗弧菌(Vibrio anguillarum)胞外产物中蛋白酶的纯化及其性质

对鳗弧菌 (Vibrioanguillarum)胞外产物中蛋白酶的纯化方法及其性质进行了研究 .其中 ,蛋白酶的纯化步骤包括 :(1)硫酸铵沉淀 ;(2 )SephadexG 10 0凝胶过滤 ;(3)DEAE Sepharose色谱分离 ;(4)DEAE Cellulose (DE 32 )色谱分离 .经上述纯化步骤得到两种蛋白酶 ,经SDS PAGE分析 ,Mr分别为 37.4× 10 3 和 33.1× 10 3 .以偶氮酪蛋白 (azocasein)作底物测其水解酶活性 ,结果表明二者差别显著 ,前者明显高于后者 .而且 ,Mr37.4× 10 3 的蛋白酶在pH 7～ 10范围内均显示较高活性 ,在 4 0～ 6 0℃范围内稳定性好 .结果表明该蛋白酶是一种金属蛋白酶 .关于该蛋白酶对牙鲆(Paralichtysolivaceus)的毒性作用尚在研究之中 .图 6表 3参 17     

APM对小麦根尖分生组织细胞异常有丝分裂的诱导

探讨了不同浓度（c／μmol．L－1）和不同处理时间（t／h）下APM对小麦根尖分生组织细胞有丝分裂的影响．实验结果表明，在c（APM）＝1～4μmol／L、处理t＜5h可明显提高有丝分裂指数，对前期和中期细胞分裂的促进作用更为明显；但c（APM）的增加与有丝分裂指数的提高无明显线型关系；APM可促使间期细胞微核形成、中期细胞染色体聚合现象和扰乱纺锤丝的功能．纺锤丝功能上的扰乱可引起细胞的“不均等分裂”和“多极化分裂”形成上述两种细胞异常有丝分裂的临界浓度和处理时间分别为c＝5μmol／L和t＞5h．     

腺叶香茶菜的化学成分研究

从腺叶香茶菜［Rabdosiaadenoloma（Hand．－Mazz．）Hara］地上部分的乙醇提取物中共分离出10个化合物．经EIMS、1HNMR和13CNMR等波谱和化学方法分别鉴定为：effusaninA（1）、effusaninE（2）、洋芹素－4＇，7－二甲醚（3）、β－谷甾醇（4）、柳杉二醇（5）、Uvaol（6）、白桦酸（7）、齐墩果酸（8），乌苏酸（9），齐墩果酸－3－O－α－L－鼠李吡喃糖基（1→2）［β－D－葡萄吡喃糖基－（1→4）］－α－L－阿拉伯吡喃糖甙（10）．其中8的含量高达1％以上．上述化学成分均为首次从该植物中分离得到．     

铝胁迫下不同耐铝小麦品种活性氧代谢差异及与小麦耐铝性的关系

逆境条件下植物体内产生并累积活性氧从而破坏植物组织结构与功能,同时植物也可以通过改变活性氧代谢相关酶活性清除活性氧而减轻活性氧伤害以适应环境胁迫。为研究铝胁迫下不同耐铝小麦品种（TriticumaestivumL．）在活性氧代谢上的差异及与小麦耐铝性的关系,本试验选用小麦品种ET8（耐铝型）、ES8（铝敏感型）为试验材料研究了不同耐铝小麦品种活性氧代谢变化上的差异。结果表明,50μmol·L-1铝处理24h,ET8和ES8活性氧含量显著升高,O2产生速率增幅分别为10．5％和20．4％,H202含量增幅分别为3．3％和7．6％。ET8和ES8超氧化物歧化酶（SOD）活性增幅分别为11．9％和41．6％,过氧化物酶（POD）活性增幅为51．8％和77．8％,抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性增幅为54．4％和29．1％,过氧化氢酶（CAT）活性增幅为32．9％和38．4％,谷胱甘肽还原酶（GR）活性增幅为83．1％和85．5％。虽然抗氧化酶活性增加后会清除一部分活性氧,但活性氧的累积仍然造成了膜脂的过氧化,ET8和ES8丙二醛（MDA）含量分别增加18．2％和50．0％,质膜透性也随着MDA含量的升高而增加,增幅分别为1．25倍和1．36倍。综上所述,不同耐铝品种间活性氧代谢的差异是小麦品种耐铝性差异显著的原因之一。     

phlb基因在普通小麦与簇毛麦杂种F1中的作用

通过CS、CSph1b与Haynaldiavillosa杂交,幼胚拯救,获杂种F1,其结实率分别为6．67％（12／18）、625％（25／400）对杂种F1植株花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ染色体行为观察发现CS×H.villosa杂种F1平均每PMC仅有1．61条染色体形成二价体和三价体,平均构型为2n＝28＝26．391＋0．79Ⅱ＋0．007Ⅲ,平均染色体交叉数为0．84;而CSph1b×H．villosa杂种F1每PMC中有14．43条染色体发生联会,形成二价体和多价体,平均约型为2n＝28＝13．551Ⅰ＋5．95Ⅱ＋0．55Ⅲ＋0．22Ⅳ,为9．72,其中56％以上的PMC具1～4个多价体（三、四价体）表明Ph1b基因强烈诱导了普通小麦与H.villosa间的部分同源染色体配对杂种F1育性极差,自交均不结实.CS×H.villosa杂种F1与CS回交结实率为6．67％（4／60）,但CSph1b×H．villosa杂种F1与CS、CSph1b回交极难,结实率仅为0．45％（6／1320）．CSph1b×H．villosa杂种已与普通小麦回交成功,为利用ph1b实现簇毛麦优良基因直接对小麦遗转移奠定了基础．     

镉对桑蚕生长发育和蚕茧质量影响的研究

研究了土壤镉对桑叶含镉量［w（Cd）］、含水量［w（H2O）］的影响以及镉对蚕生长发育和蚕茧质量的影响结果表明：（1）桑叶w（Cd）与土壤w（Cd）呈极显著正相关（2）土壤w（Cd）＞22．3×10-6,则桑叶w（H20）＜75％,叶质开始变粗硬,（3）用w（Cd）＜3．66×10-6的添加Cd桑叶养蚕时,蚕能正常生长发育,蚕茧质量不受影响（4）当镉由土壤进入桑叶,用w（Cd）＜0．49×10-6的桑叶养蚕时,蚕的生长发育和蚕茧质量不受明显影响（5）当桑叶w（Cd）超过上述数值后,蚕的生长发育受阻,蚕茧质量明显下降。     

蛋白酶抑制剂对杨扇舟蛾的中肠蛋白酶作用的研究

研究了杨扇舟蛾幼虫的中肠几种主要蛋白酶活性．以14C-酪蛋白为底物测定的总消化酶活性在碱性缓冲液中最高；特异蛋白酶抑制剂研究表明：只有丝氨酸蛋白酶抑制剂对中肠蛋白酶活性有抑制作用，其它的特异蛋白酶抑制剂如半光氨酸蛋白酶抑制剂、天门冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂对中肠的酶活均无抑制作用，可以认为杨扇舟蛾的中肠蛋白酶以丝氨酸蛋白酶为主．以特异的p－nitroanilide为底物测定胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和亮氨酸蛋白酶活性在碱性缓冲液中最高，且以弹性蛋白酶活性最高．在所研究的23个丝氨酸蛋白酶抑制剂中，抑制作用最强的是马铃薯蛋白酶抑制剂I和南瓜韧皮胰蛋白酶抑制剂．本研究丰富了对杨扇舟蛾的中肠蛋白酶种类的了解，为杨树抗虫基因构建和转化提供了依据．     

绿僵菌降解寄主表皮的蛋白酶同工酶研究

研究了不同碳氮源对金龟子绿僵菌（ Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ） 产生与分解昆虫外壳相关的蛋白酶活性和同工酶谱带的影响． 结果表明：蝉蜕、虻虫壳、蝇蛆壳、蚕蛹壳、虾壳、胶体几丁质均可使金龟子绿僵菌产生蛋白酶,虾壳和胶体几丁质所产生的蛋白酶比活性最高,蝉蜕次之． 但蛋白酶总活性以蝉蜕最高,虻虫壳次之．样品经等电聚焦电泳后,印迹于Ｘ光片上,显示蛋白酶同工酶,蝉蜕和蚕蛹壳产生的蛋白酶同工酶谱带最丰富． 以蝉蜕为唯一碳氮源时,金龟子绿僵菌产生蛋白酶的最佳条件为２６℃、初始ｐＨ６．０ 、最终孢子浓度ｎ＝ １×１０７ｍＬ－１ ．     

单甲脒农药对大豆—土壤系统的生态影响

研究了单甲脒农药（DMAH）对大豆－土壤系统的生态影响．结果表明：除CK外，5个设置浓度［（DMAH）／mL·L－1］0．25、0．5、2．5、5.0、25均对大豆虫害有不同的防治效果．其中＞2．5时可防治大豆多种虫害；大豆对DMAH稀释液的pH值反应敏感，高浓度处理的叶片因酸度大而出现药害；推荐浓度［（DMAH）＝0．25mL·L－1］，对植株的生长和生理功能有促进作用．可使总生物量及产量分别增加20％左右，且籽粒中农药无残留，土壤农药残留量也小；当处理pH值＜5时会对叶片有伤害．生理功能被抑制，总生物量及产量都不如CK；DMAH在植物器官及土壤都有不同程度的残留量．其中叶残留量大于籽粒及土壤．可以认为，低浓度DMAH处理不会对植物－土壤系统造成污染．     

杀虫剂敌敌畏对黑眶蟾蜍蝌蚪的毒性影响

采用静态换水法研究了杀虫剂敌敌畏（dichlorvos，DDVP）对黑眶蟾蜍（Bufo melanostictus）蝌蚪的急性毒性和生长发育、生理活动的影响．结果表明，DDVP对黑眶蟾蜍蝌蚪的96h半数致死浓度（LC50，96h）为51．61mg／L．暴露于2．24mg／L的DDVP溶液中10d和20d，蝌蚪的体长日增长率分别降低24．9％和9．5％，并引起黑眶蟾蜍蝌蚪酯酶同工酶（EST）酶带数和强弱发生改变，抑制了蝌蚪的酯酶同工酶活性，而超氧化物歧化酶（SOD）比活受到的影响相对较小．暴露于6．72mg／L的DDVP溶液中10d和20d，蝌蚪的体长日增长率分别降低27．0％和38．8％，酯酶同工酶（EST）酶带的强弱发生明显的改变，SOD酶比活明显低于对照组．说明杀虫剂敌敌畏对黑眶蟾蜍蝌蚪可造成一定的毒性影响．图2表4参22     

增塑剂DIDP对肝脏氧化应激损伤及VitE拮抗作用研究

研究增塑剂邻苯二甲酸二异癸酯(didecyl phthalate, DIDP)致雄性小鼠肝损伤作用及其机理。以雄性BALB/c小鼠为受试动物,随机分为7组,包括溶剂对照组(生理盐水)、4个DIDP染毒组(0.15、1.5、15和150 mg·kg~(-1))、维生素E(vitamin E, VitE)(100 mg·kg~(-1))处理组和DIDP+维生素E处理组(150 mg·kg~(-1)DIDP+100 mg·kg~(-1)VitE),连续灌胃14 d。以肝组织匀浆测定活性氧(reactive oxygen species, ROS)、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和细胞凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartic proteinase 3, Caspase-3)水平。采用动物自动生化分析仪检测肝功能指标血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、白蛋白(albumin, ALB)水平,并同时观察肝组织的病理变化与荧光染色结果。随着DIDP染毒剂量的增加,小鼠肝组织ROS、MDA和Caspase-3含量逐渐上升,血清ALT和AST水平也逐渐上升,GSH含量逐渐降低,血清ALB水平也逐渐降低,差异具有统计学意义(P 0.05,P 0.01); VitE处理组ROS、MDA和Caspase-3含量相应降低,血清ALT和AST水平也相应降低,GSH含量逐渐上升,血清ALB水平也相应上升。小鼠肝组织形态观察结果表明,随着DIDP染毒剂量的增加,小鼠肝组织的病理损伤程度呈上升趋势。研究表明,较高剂量(≥15 mg·kg~(-1))的DIDP能造成小鼠的肝脏损伤与细胞凋亡,抗氧化剂VitE可使肝脏损伤与细胞凋亡减轻,对小鼠肝组织起保护作用,说明氧化应激介导了DIDP对机体的损伤。     

Metabolites of sulfur‐containing derivatives of the fungicides pentachloronitrobenzene and hexachlorobenzene in mammals,separated by capillary gas chromatography and identified by negative and positive Cl mass spectrometry

Biotransformation products of sulfur‐containing derivatives of pentachloronitro‐benzene and hexachlorobenzene in mammals, such as thiophenols, thioanisoles, phenols, anisoles and chlorinated benzenes have been identified by mass spectrometry of negative and positive ions produced by chemical ionisation. The capillary gas chromatograms of extracts from excreta of rats after application of N‐acetyl‐S‐(pentachlorophenyI)‐D,L‐cysteine, as well as of rabbits after application of S,S'‐(tetrachloro‐p‐phenylene)‐L,L'‐dicysteine, are shown.     

Halogenated hydrocarbons and aryl hydrocarbons identified in human tissues

New methods for the preparation and purification of nephrotoxic cysteine conjugates of chloro‐ and fluoro‐alkenes are described. The methods are applicable to a wide range of cysteine, N‐acetyl cysteine and glutathione conjugates and examples have been given of the synthesis and characterisation of two novel glutathione conjugates.     

水稻土中半胱氨酸分解产生含硫气体的研究

在室内培养条件下,测定了水稻土中含硫气体的释放．结果表明,该土壤中有硫化氢(Ｈ２Ｓ),羰基硫(ＣＯＳ),二甲基硫(ＤＭＳ)三种气体释放．当土壤中加入半胱氨酸后,ＣＯＳ和Ｈ２Ｓ气体的浓度有了明显增加,并有ＣＳ２和ＣＨ３ＳＨ测出,而ＤＭＳ的浓度变化不大．这些结果表明半胱氨酸的分解可能是 ＣＯＳ,Ｈ２Ｓ,ＣＳ２和 ＣＨ３ＳＨ的产生源之一．在好氧(正常大气)条件下,Ｈ２Ｓ,ＣＯＳ,ＣＳ２和ＣＨ３ＳＨ的释放量低于厌氧(氮气氛围)条件下的释放量,ＤＭＳ则高于厌氧条件下．这表明水稻土中半胱氨酸分解产生 Ｈ２Ｓ,ＣＯＳ,ＣＳ２和 ＣＨ３ＳＨ需较强的还原条件,产生这四种气体的微生物需要严格的厌氧条件．产生ＤＭＳ的微生物则比前者需要高一些的含氧量．在光照条件下,各含硫气体的释放量普遍高于无光照条件下的释放量．释放含硫气体的大多数微生物适宜的含水率为５０%且对土壤的ｐＨ值有一定要求．     

鱼体甲基汞的萃取富集和测定

研究了苯萃取和半胱氨酸滤纸富集再用苯洗脱的方法,使鱼肉中甲基汞得到富集和提取。建立了气相色谱测定甲基汞的方法并对所建立的方法进行评价。结果表明:加标回收率为87.10%～105.69%;变异系数为2.93%。符合要求,大量样品实验表明,该方法适用于痕量甲基汞的提取和分析。     

极低频电磁场对萌发期大豆的生物学效应

观察了50Hz.0.2mT或6.0mT的电磁场暴露对大豆的萌发过程，丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT），过氧化物酶（POD），蛋白酶活性和可溶性蛋白含量以及幼苗根茎的组织形态学影响。结果表明：电磁场暴露下，大豆的开始萌发时间由32h提前到8h，萌发率到达50％的时间由72h分别提前到48h(0.2mT组）和40h(6.0mT组）；MDA含量随磁场强度的增大而下降；SOD，POD活性随磁场强度的增大而升高，而CAT活性在0.2mT暴露组下降，在6.0mT暴露组升高；蛋白酶活性和可溶性蛋白含量分别随磁场强度的增大升高或降低。幼苗根茎细胞的大小和形态没有明显变化。结果提示，极低频电磁场可以改变抗氧化酶的活性，减缓脂质过氧化，增强蛋白酶的活性，促进大豆的萌发过程。图4参6。     

The influence of bacterial quorum-sensing inhibitors against the formation of the diatom-biofilm

Quorum-sensing inhibitor (QSI) is one of the most promising and environmentally friendly agents for marine antifouling. In this study, the activities of three kinds of QSIs 3,4-dibromo-2(5)H-furanone, 4-nitropyridine-N-oxide and indole were evaluated on the growth of two marine diatoms Cylinthrotheca sp. and Nitzschia closterium. At the same time, the effects of QSIs on the formation of the diatom-biofilm were also discussed. All the results showed that QSIs significantly inhibited the growth, and the effects depended on the dose and diatom species. The extracellular polymeric substance contents in the diatom-biofilm were significantly reduced by QSIs. However, the contents of polysaccharide in culture mediums were increased, which might result in the destruction of diatom cells. Combined with the results of crystal violet staining-biofilm and images of scanning electron microscopy, it was further demonstrated that QSIs inhibited the biofilm formation of Cylindrotheca sp., and the inhibitory effect of 4-nitropyridine-N-oxide was superior to that of 3,4-dibromo-2(5)H-furanone and indole.     

大豆胰蛋白酶抑制剂对斜纹夜蛾生长发育的影响

以广食性害虫斜纹夜蛾（Prodenia litura Fabriciu）为研究对象,连续6代自二龄或三龄开始用含有大豆胰蛋白酶抑制剂（soybean trypsin inhibitor,SBTI）的人工饲料饲养幼虫,饲养至乳化时分别测定SBTI对斜纹夜蛾幼虫体质量、发育历期和蛹质量的影响。结果表明,SBTI显著抑制幼虫体质量的增长,使幼虫发育延缓,连续饲养6代,与对照相比,对2龄、3龄SBTI处理的幼虫体质量的抑制率分别从60%降至21%、49%降至17%;SBTI显著抑制斜纹夜蛾的蛹质量,使蛹质量减轻,连续饲养6代,与对照相比,对2龄、3龄SBTI处理的幼虫其蛹质量的抑制率分别从37%降至4%、16%降至2%;SBTI延迟幼虫的生长发育,使得世代历期延长;而且SBTI对低龄幼虫的抑制作用更加显著。随着继代代数的增加,SBTI对幼虫体质量的抑制作用减小,体质量增长加快,幼虫发育期缩短;SBTI对蛹质量的抑制作用减弱,蛹质量增加,斜纹夜蛾世代历期缩短。研究结果说明斜纹夜蛾可以通过调节自身的生长发育过程,提高幼虫适应SBTI的能力,逐步缓解SBTI的抑制作用。     

农田中氮肥的损失与对策

评述了我国有关农田中氮肥的损失及其对策的研究结果。主要涉及农田中氮肥的损失程度、途径和机理;氮肥损失对环境的影响;减少氮肥损失、提高氮肥利用率的技术原则和主要措施。这些措施包括确定适宜的施氮量,以及采用深施、水肥综合管理、平衡施肥、脲酶抑制剂、硝化抑制剂、液态分子膜等。